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- Xybio
- 上海
- P4521
- 2025年07月05日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
Plasmid#55759;albuminenhancer/promot
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：pALB-GFP小鼠启动子质粒
别称: Plasmid#55759;albuminenhancer/promot
启动子：ALB
复制子: pUC
原核抗性: Kan
筛选标记：G418
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：哺乳细胞
载体用途：启动子检测
基因种属：小鼠
基因类型：Promoter
原核抗性：Kan
真核抗性：Neo/G418
荧光蛋白：绿色
质粒简介
pALB-GFP小鼠启动子质粒
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P3962/pCMV-SPORT6-CENPQ人源基因质粒 |
| P3963/pCMV-SPORT6-PAIP1（1点突变）人源基因质粒 |
| P3964/pCMV-SPORT6-TRIM63（1-975bpA709G）人源基因质粒 |
| P3965/pCMV-SPORT6-GALT（1点突变）人源基因质粒 |
| P3966/pCMV-SPORT6-SPSB1人源基因质粒 |
| P3967/pCMV-SPORT6-ZNF408人源基因质粒 |
| P3968/pCMV-SPORT6-ARHGDIA人源基因质粒 |
| P3969/pCMV-SPORT6-NCAPH2（219-1818bp）人源基因质粒 |
| P3971/pCMV-SPORT6-C11orf74人源基因质粒 |
| P3972/pCMV-SPORT6-PBXIP1人源基因质粒 |
| P3973/pCMV-SPORT6-USP48人源基因质粒 |
| P3974/pCMV-SPORT6-ABCD1人源基因质粒 |
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文献和实验galaxyzj 我有一个真核表达载体，包含一个Iba1启动子，来源于巨噬细胞的特异性基因Iba1，因此是个组织特异性的启动子，用来控制GFP的表达。启动子的结构见图1，其中加框部分是外显子序列。载体的结构见图2。 载体的构建人说，这个载体的开放阅读框起始是Iba1基因自身的ATG，也就是图1里面Exon1内部加了下划红线ATG，GFP的起始密码ATG也是在一个读码框内。因此，这个载体最后表达GFP蛋白，并且N端融合了Iba1的外显子编码的17
-GFP 等）以及其他应用的质粒。根据质粒的拷贝数不同，又可以分为高拷贝质粒（质粒可以在细胞内复制成几百个拷贝）和低拷贝质粒（质粒在细胞内只有＜20 个拷贝）。质粒的拷贝数通常受到复制子的调控。 质粒上通常会带有多种元件，例如，复制起始位点（ORI），抗性基因，多克隆位点，启动子，终止子，标签序列等等。质粒上至少要带有复制位点（ORI），否则无法进行复制；除了一些特殊质粒（如 minicircle plasmid）之外，绝大多数质粒都带有抗性基因，用于抗生素筛选。多克隆位点可以通过酶切，酶连或者同源
Nanobiotechnology. 2020 Jan 9;18(1):10. 二、慢病毒介导 CD63-GFP 表达： 将外泌体的特定蛋白 CD63 和绿色荧光蛋白 GFP 的表达元件构建成质粒再包装到慢病毒中，随后用此慢病毒感染细胞，使细胞分泌的外泌体带有绿色荧光。 图6 用 GFP 标记的外泌体分别与 SH-SY5Y、BV2 和 DRG 细胞共培养 Artif Cells Nanomed Biotechnol. 2019 Dec;47(1):2918-2929. 图7 注射有 CD63-GFP 的外泌体后观察
