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- Xybio
- 上海
- P4843
- 2025年07月10日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
NM_009463
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：pGEM-ucp1-A8G-m（1同义突变）小鼠基因质粒
别称: NM_009463
复制子: pUC
原核抗性: Amp
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：PCR模板
基因种属：小鼠
基因类型：cDNA
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
pGEM-ucp1-A8G-m（1同义突变）小鼠基因质粒
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P4278/pCMV-SPORT6-TNFRSF21（428-1968bp）人源基因质粒 |
| P4279/pCMV-SPORT6-EBAG9人源基因质粒 |
| P4280/pCMV-SPORT6-APH1A人源基因质粒 |
| P4281/pCMV-SPORT6-VSIR（1点突变）人源基因质粒 |
| P4282/pCMV-SPORT6-WDR77人源基因质粒 |
| P4287/pCMV-SPORT6-CRADD人源基因质粒 |
| P4286/PCMV-SPORT6-CCDC127人源基因质粒 |
| P4285/PCMV-SPORT6-CIDEC（5-756bp1同义突变）人源基因质粒 |
| P4284/PCMV-SPORT6-SSSCA1人源基因质粒 |
| P4283/PCMV-SPORT6-AGR2（1同义突变）人源基因质粒 |
| P4277/pCMV-SPORT6-TSPAN6（1同义突变）人源基因质粒 |
| P4271/pCMV-SPORT6-SMYD3人源基因质粒 |
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文献和实验实验试剂 试剂配制： 1 .1 M Tris.Cl(pH 7.5)(100 ml)：12.1g Tris碱，加80 ml ddH2 O，浓HCl调pH 7.5，定容至100 ml； 2. 0.5 M EDTA(pH 8.0) (100 ml)：18.6g EDTANa2 .2H2 O， 70 ml ddH2 O，NaOH调pH 8.0，定容至100 ml； 3. 1xTE(pH 7.5) (100 ml
reversible co-suppression of homologous genes in tran s. Plant Cell 2 , 2 79-289. 7. Rom ano , N. an d M acin o , G. ( 1 9 9 2 ) Quelling - tran sien t inactivation of g en e-ex pressio n in Neurosporacra^ssa by transform ation
，并且 EST12-RACK1 诱导的细胞焦亡在 M.tb 诱导的免疫中起关键作用。 研究内容： 1、RD 区编码蛋白筛选：对 40 种 RD 区（RD1-3、11-14）重组蛋白进行筛选（巨噬细胞焦磷酸相关蛋白），通过 LDH 释放实验细胞毒性分析，发现 EST12 对巨噬细胞有显著焦解作用。 2、菌株构建：构建 M. tb H37Rv ΔEST12（Rv1579c 敲除菌株）、BCG-EST12（Rv1579c 过表达菌株）、M. smeg–EST12（Rv1579c 过表达菌株）。 3、小鼠基因
