pUC57s-Lox-m(356-1236bp)小鼠基因质粒

基本信息
名称：pUC57s-Lox-m(356-1236bp)小鼠基因质粒
别称: NM_010728.3
复制子: pUC
原核抗性: Amp
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度

质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：PCR模板
基因种属：小鼠
基因类型：cDNA
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光蛋白：

质粒简介
   pUC57s-Lox-m(356-1236)(NM_010728.3)是一个小鼠基因截短克隆质粒。

质粒图谱


质粒序列
LOCUS       Exported                3488 bp ds-DNA     circular SYN 21-JAN-2018
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..3488
                     /organism="synthetic DNA construct"
                     /mol_type="other DNA"
     primer_bind     379..395
                     /label=M13 fwd
                     /note="common sequencing primer, one of multiple similar 
                     variants"
     misc_feature    444..1196
                     /label=Lox-m(356-1236)
     primer_bind     complement(1267..1283)
                     /label=M13 rev
                     /note="common sequencing primer, one of multiple similar 
                     variants"
     rep_origin      complement(1669..2257)
                     /direction=LEFT
                     /label=ori
                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                     replication"
     CDS             complement(2428..3288)
                     /codon_start=1
                     /gene="bla"
                     /product="beta-lactamase"
                     /label=AmpR
                     /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
                     related antibiotics"
                     /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
                     ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
                     PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
                     EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
                     LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
                     LIKHW"
     promoter        complement(3289..3393)
                     /gene="bla"
                     /label=AmpR promoter
ORIGIN
        1 tcgcgcgttt cggtgatgac ggtgaaaacc tctgacacat gcagctcccg gagacggtca
       61 cagcttgtct gtaagcggat gccgggagca gacaagcccg tcagggcgcg tcagcgggtg
      121 ttggcgggtg tcggggctgg cttaactatg cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc
      181 accatatgcg gtgtgaaata ccgcacagat gcgtaaggag aaaataccgc atcaggcgcc
      241 attcgccatt caggctgcgc aactgttggg aagggcgatc ggtgcgggcc tcttcgctat
      301 tacgccagct ggcgaaaggg ggatgtgctg caaggcgatt aagttgggta acgccagggt
      361 tttcccagtc acgacgttgt aaaacgacgg ccagtgaatt ggagatcggt acttcgcgaa
      421 tgcgtcgaga tcccattgaa ttcggcgacg acccctacaa tccctacaag tactccgacg
      481 acaaccccta ttataactac tatgacacgt atgagaggcc ccggcccggg agcaggaacc
      541 gacctggata cggcaccggt tacttccagt acggtctccc ggacctggtg cccgacccct
      601 actacatcca ggcttccacg tacgtccaga agatgtctat gtacaacctg agatgcgctg
      661 cggaagaaaa ctgcctggcc agttcagcat atagggcgga tgtcagagac tatgaccaca
      721 gggtactgct acgatttccg caaagagtga agaaccaagg gacatcggac ttcttaccaa
      781 gccgccctcg gtactcctgg gagtggcaca gctgtcacca acattaccac agcatggacg
      841 agttcagcca ctatgacctg cttgatgcca acacacagag gagagtggct gaaggccaca
      901 aagcaagctt ctgtctggag gacacgtcct gtgactatgg gtaccacagg cgctttgcgt
      961 gcactgcaca cacacaggga ttgagtcctg gatgttatga cacctatgcg gcagacatag
     1021 actgccagtg gattgatatt acagatgtac aacctggaaa ctacattcta aaggtcagtg
     1081 taaaccccag ctacctggtg cctgaatcag actacactaa caatgttgta cgctgtgaca
     1141 ttcgctacac aggacatcat gcctatgcct caggctgcac aatttcaccg tattagagtc
     1201 gaccccatta tcggatgccg ggaccgacga gtgcagaggc gtgcaagcga gcttggcgta
     1261 atcatggtca tagctgtttc ctgtgtgaaa ttgttatccg ctcacaattc cacacaacat
     1321 acgagccgga agcataaagt gtaaagcctg gggtgcctaa tgagtgagct aactcacatt
     1381 aattgcgttg cgctcactgc ccgctttcca gtcgggaaac ctgtcgtgcc agctgcatta
     1441 atgaatcggc caacgcgcgg ggagaggcgg tttgcgtatt gggcgctctt ccgcttcctc
     1501 gctcactgac tcgctgcgct cggtcgttcg gctgcggcga gcggtatcag ctcactcaaa
     1561 ggcggtaata cggttatcca cagaatcagg ggataacgca ggaaagaaca tgtgagcaaa
     1621 aggccagcaa aaggccagga accgtaaaaa ggccgcgttg ctggcgtttt tccataggct
     1681 ccgcccccct gacgagcatc acaaaaatcg acgctcaagt cagaggtggc gaaacccgac
     1741 aggactataa agataccagg cgtttccccc tggaagctcc ctcgtgcgct ctcctgttcc
     1801 gaccctgccg cttaccggat acctgtccgc ctttctccct tcgggaagcg tggcgctttc
     1861 tcatagctca cgctgtaggt atctcagttc ggtgtaggtc gttcgctcca agctgggctg
     1921 tgtgcacgaa ccccccgttc agcccgaccg ctgcgcctta tccggtaact atcgtcttga
     1981 gtccaacccg gtaagacacg acttatcgcc actggcagca gccactggta acaggattag
     2041 cagagcgagg tatgtaggcg gtgctacaga gttcttgaag tggtggccta actacggcta
     2101 cactagaaga acagtatttg gtatctgcgc tctgctgaag ccagttacct tcggaaaaag
     2161 agttggtagc tcttgatccg gcaaacaaac caccgctggt agcggtggtt tttttgtttg
     2221 caagcagcag attacgcgca gaaaaaaagg atctcaagaa gatcctttga tcttttctac
     2281 ggggtctgac gctcagtgga acgaaaactc acgttaaggg attttggtca tgagattatc
     2341 aaaaaggatc ttcacctaga tccttttaaa ttaaaaatga agttttaaat caatctaaag
     2401 tatatatgag taaacttggt ctgacagtta ccaatgctta atcagtgagg cacctatctc
     2461 agcgatctgt ctatttcgtt catccatagt tgcctgactc cccgtcgtgt agataactac
     2521 gatacgggag ggcttaccat ctggccccag tgctgcaatg ataccgcgag acccacgctc
     2581 accggctcca gatttatcag caataaacca gccagccgga agggccgagc gcagaagtgg
     2641 tcctgcaact ttatccgcct ccatccagtc tattaattgt tgccgggaag ctagagtaag
     2701 tagttcgcca gttaatagtt tgcgcaacgt tgttgccatt gctacaggca tcgtggtgtc
     2761 acgctcgtcg tttggtatgg cttcattcag ctccggttcc caacgatcaa ggcgagttac
     2821 atgatccccc atgttgtgca aaaaagcggt tagctccttc ggtcctccga tcgttgtcag
     2881 aagtaagttg gccgcagtgt tatcactcat ggttatggca gcactgcata attctcttac
     2941 tgtcatgcca tccgtaagat gcttttctgt gactggtgag tactcaacca agtcattctg
     3001 agaatagtgt atgcggcgac cgagttgctc ttgcccggcg tcaatacggg ataataccgc
     3061 gccacatagc agaactttaa aagtgctcat cattggaaaa cgttcttcgg ggcgaaaact
     3121 ctcaaggatc ttaccgctgt tgagatccag ttcgatgtaa cccactcgtg cacccaactg
     3181 atcttcagca tcttttactt tcaccagcgt ttctgggtga gcaaaaacag gaaggcaaaa
     3241 tgccgcaaaa aagggaataa gggcgacacg gaaatgttga atactcatac tcttcctttt
     3301 tcaatattat tgaagcattt atcagggtta ttgtctcatg agcggataca tatttgaatg
     3361 tatttagaaa aataaacaaa taggggttcc gcgcacattt ccccgaaaag tgccacctga
     3421 cgtctaagaa accattatta tcatgacatt aacctataaa aataggcgta tcacgaggcc
     3481 ctttcgtc
//

质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
         收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
         1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
              ①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
              ②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
              ③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
              ④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
              ⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
              ⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
        2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
              四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
        3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
              穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
        4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
              直接挑取单菌落至液体培养基中。
        5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
              单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
        6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
              收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。

二、转化图片

P3920/pCMV-SPORT6-FAM206A人源基因质粒

P3921/pCMV-SPORT6-CLDN11人源基因质粒

P3922/pCMV-SPORT6-CAST（52-2253bp）人源基因质粒

P3923/pCMV-SPORT6-MFN2人源基因质粒

P3924/pCMV-SPORT6-G0S2人源基因质粒

P3925/pCMV-SPORT6-TUBG2人源基因质粒

P3926/pCMV-SPORT6-UBLCP1人源基因质粒

P3927/pCMV-SPORT6-TADA3人源基因质粒

P3928/pCMV-SPORT6-PTS人源基因质粒

P3929/pCMV-SPORT6-MYD88人源基因质粒

P3930/pCMV-SPORT6-LMF1人源基因质粒

P3931/pCMV-SPORT6-DLX4人源基因质粒