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- Xybio
- 上海
- P1642
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
Plasmid#15387
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：LB1376 (Bcl-2 P1 promoter with MHS1234)人源启动子质粒
别称: Plasmid#15387
复制子: pUC
原核抗性: Amp
筛选标记：Hyg
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：哺乳细胞
载体用途：启动子检测
基因种属：人
基因类型：Promoter
原核抗性：Amp
真核抗性：Hyg
荧光蛋白：
质粒简介
LB1376 (Bcl-2 P1 promoter with MHS1234)是一个哺乳细胞Bcl-2P1启动子荧光素质粒。
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P4229/pCMV-SPORT6-TBC1D23（1055-2055bp1同义突变）人源基因质粒 |
| P4230/pCMV-SPORT6-SIAH2人源基因质粒 |
| P4231/pCMV-SPORT6-TCTN2人源基因质粒 |
| P4232/pCMV-SPORT6-IRF2人源基因质粒 |
| P4233/pCMV-SPORT6-ACAD11（724-2343bp）人源基因质粒 |
| P4234/pCMV-SPORT6-TIMP4人源基因质粒 |
| P4235/pCMV-SPORT6-PPP1CC人源基因质粒 |
| P4236/pCMV-SPORT6-FAM122A人源基因质粒 |
| P4237/pCMV-SPORT6-CTNND1人源基因质粒 |
| P4238/pCMV-SPORT6-GPS2人源基因质粒 |
| P4239/pCMV-SPORT6-C7orf42人源基因质粒 |
| P4240/pCMV-SPORT6-MRGPRF人源基因质粒 |
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文献和实验基的发明者已在其文章“20世纪中期溶源性研究进展：P1、P2以及其他实验系统”中说明，命名原意是溶源性培养基的简称，而不是他和他同事Salvadr Luria的名字简称。 2、自己配制 培养基比购买市售产品便宜的多，且一些市售产品可能会含有抑制某些株的大肠杆菌生长的污染物，但如果自己培养LB培养基，需对其配制过程进行严格控制，避免批间差异[3]。 3、目前有多种LB培养基的配方，一般主要为：10g胰蛋白胨、5g酵母提取物、10g氯化钠，溶于1L无菌水内，用1N 氢氧化钠调节
BACs, PACs, P1s and Plasmid Isolation Protocol (standard protocol)
a single colony from a freshly streaked selective plate, and inoculate a starter culture of 2-5 ml LB or YT medium containing the appropriate selective antibiotic. Incubate for ~ 20-24 hr at 37°C with vigorous shaking (~ 300 rpm). Use a flask
E.Z.N.A. Endo-Free BACs, PACs, P1s Protocol
实验步骤 1. Isolate a single colony from a freshly streaked selective plate, and inoculate a starter culture of 2-5 ml LB or YT medium containing the appropriate selective antibiotic. Incubate for ~ 20-24 hr at 37°C
