- ￥100 - 1000
- Xybio
- 上海
- P0769
- 2025年07月10日
9 年钻石会员
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
ARHS;RHO6;RHOS
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pCDNA3.1-FLAG-Rnd1人源基因质粒
别称: ARHS;RHO6;RHOS
启动子: CMV
质粒分类: 基因文库质粒
复制子: pUC
原核抗性: Amp
筛选标记: G418
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：哺乳细胞
载体用途：蛋白表达
基因种属：人
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：Neo/G418
荧光蛋白：
质粒简介
Homo sapiens Rho family GTPase 1。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 6110 bp ds-DNA circular SYN 27-FEB-2018
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..6110
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
enhancer 235..614
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 615..818
/label=CMV promoter
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
promoter 863..881
/label=T7 promoter
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
CDS 944..967
/codon_start=1
/product="FLAG(R) epitope tag, followed by an enterokinase
cleavage site"
/label=FLAG
/translation="DYKDDDDK"
CDS 968..1666
/codon_start=1
/label=Rnd1
/translation="MKERRAPQPVVARCKLVLVGDVQCGKTAMLQVLAKDCYPETYVPT
VFENYTACLETEEQRVELSLWDTSGSPYYDNVRPLCYSDSDAVLLCFDISRPETVDSAL
KKWRTEILDYCPSTRVLLIGCKTDLRTDLSTLMELSHQKQAPISYEQGCAIAKQLGAEI
YLEGSAFTSEKSIHSIFRTASMLCLNKPSPLPQKSPVRSLSKRLLHLPSRSELISSTFK
KEKAKSCSIM"
polyA_signal 1710..1934
/label=bGH poly(A) signal
/note="bovine growth hormone polyadenylation signal"
rep_origin 1980..2408
/direction=RIGHT
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 2422..2751
/label=SV40 promoter
/note="SV40 enhancer and early promoter"
CDS 2818..3612
/codon_start=1
/gene="aph(3')-II (or nptII)"
/product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"
/label=Neo
/note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418
(Geneticin(R))"
/translation="MIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGRP
VLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLLS
SHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPATC-PFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEHQ
GLAPAELFARLKARMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA
LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"
polyA_signal 3786..3907
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
protein_bind 3980..3996
/label=lac operator
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
promoter complement(4004..4034)
/label=lac promoter
/note="promoter for the E. coli lac operon"
protein_bind 4049..4070
/label=CAP binding site
/bound_moiety="E. coli catabolite activator protein"
/note="CAP binding activates transcription in the presence
of cAMP."
rep_origin complement(4358..4943)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(5114..5974)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(5975..6079)
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
ORIGIN
1 gacggatcgg gagatctccc gatcccctat ggtgcactct cagtacaatc tgctctgatg
61 ccgcatagtt aagccagtat ctgctccctg cttgtgtgtt ggaggtcgct gagtagtgcg
121 cgagcaaaat ttaagctaca acaaggcaag gcttgaccga caattgcatg aagaatctgc
181 ttagggttag gcgttttgcg ctgcttcgcg atgtacgggc cagatatacg cgttgacatt
241 gattattgac tagttattaa tagtaatcaa ttacggggtc attagttcat agcccatata
301 tggagttccg cgttacataa cttacggtaa atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc
361 cccgcccatt gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc
421 attgacgtca atgggtggag tatttacggt aaactgccca cttggcagta catcaagtgt
481 atcatatgcc aagtacgccc cctattgacg tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt
541 atgcccagta catgacctta tgggactttc ctacttggca gtacatctac gtattagtca
601 tcgctattac catggtgatg cggttttggc agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg
661 actcacgggg atttccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc
721 aaaatcaacg ggactttcca aaatgtcgta acaactccgc cccattgacg caaatgggcg
781 gtaggcgtgt acggtgggag gtctatataa gcagagctct ctggctaact agagaaccca
841 ctgcttactg gcttatcgaa attaatacga ctcactatag ggagacccaa gctggctagc
901 gtttaaactt aagcttggta ccgagctcgg atccgccacc atggactaca aggacgacga
961 tgataagatg aaggagagac gggcccccca gccagtcgtg gccagatgta agctcgttct
1021 ggtcggggac gtgcagtgtg ggaagaccgc gatgttgcaa gtgttagcga aggattgcta
1081 tccagagacc tatgtgccca ccgtgttcga aaattacaca gcctgtttgg agacagagga
1141 acagagggtg gagcttagtc tctgggatac ctcaggatct ccctactacg ataatgtccg
1201 tccactctgc tacagcgact cggatgcagt attactatgt tttgacatca gccgtccaga
1261 gacagtggac agcgcactga agaagtggag gacagaaatc ctagattatt gtcccagcac
1321 ccgcgttttg ctcattggct gcaagacaga cctgcgaaca gacctgagta ctctgatgga
1381 gctgtcccac cagaagcagg cgcccatctc ctatgagcag ggttgtgcaa tagcaaagca
1441 gctgggtgca gaaatctacc tggaaggctc agctttcacc tcagaaaaga gcatccacag
1501 catctttcgg acggcatcca tgctgtgtct gaacaagcct agcccactgc cccagaagag
1561 ccctgtccga agcctctcca aacgactgct ccacctcccc agtcgctctg aactcatctc
1621 ttctaccttc aagaaggaaa aggccaaaag ctgttccatt atgtgactcg agtctagagg
1681 gcccgtttaa acccgctgat cagcctcgac tgtgccttct agttgccagc catctgttgt
1741 ttgcccctcc cccgtgcctt ccttgaccct ggaaggtgcc actcccactg tcctttccta
1801 ataaaatgag gaaattgcat cgcattgtct gagtaggtgt cattctattc tggggggtgg
1861 ggtggggcag gacagcaagg gggaggattg ggaagacaat agcaggcatg ctggggatgc
1921 ggtgggctct atggcttctg aggcggaaag aaccagctgg ggctctaggg ggtatcccca
1981 cgcgccctgt agcggcgcat taagcgcggc gggtgtggtg gttacgcgca gcgtgaccgc
2041 tacacttgcc agcgccctag cgcccgctcc tttcgctttc ttcccttcct ttctcgccac
2101 gttcgccggc tttccccgtc aagctctaaa tcgggggctc cctttagggt tccgatttag
2161 tgctttacgg cacctcgacc ccaaaaaact tgattagggt gatggttcac gtagtgggcc
2221 atcgccctga tagacggttt ttcgcccttt gacgttggag tccacgttct ttaatagtgg
2281 actcttgttc caaactggaa caacactcaa ccctatctcg gtctattctt ttgatttata
2341 agggattttg ccgatttcgg cctattggtt aaaaaatgag ctgatttaac aaaaatttaa
2401 cgcgaattaa ttctgtggaa tgtgtgtcag ttagggtgtg gaaagtcccc aggctcccca
2461 gcaggcagaa gtatgcaaag catgcatctc aattagtcag caaccaggtg tggaaagtcc
2521 ccaggctccc cagcaggcag aagtatgcaa agcatgcatc tcaattagtc agcaaccata
2581 gtcccgcccc taactccgcc catcccgccc ctaactccgc ccagttccgc ccattctccg
2641 ccccatggct gactaatttt ttttatttat gcagaggccg aggccgcctc tgcctctgag
2701 ctattccaga agtagtgagg aggctttttt ggaggcctag gcttttgcaa aaagctcccg
2761 ggagcttgta tatccatttt cggatctgat caagagacag gatgaggatc gtttcgcatg
2821 attgaacaag atggattgca cgcaggttct ccggccgctt gggtggagag gctattcggc
2881 tatgactggg cacaacagac aatcggctgc tctgatgccg ccgtgttccg gctgtcagcg
2941 caggggcgcc cggttctttt tgtcaagacc gacctgtccg gtgccctgaa tgaactgcag
3001 gacgaggcag cgcggctatc gtggctggcc acgacgggcg ttccttgcgc agctgtgctc
3061 gacgttgtca ctgaagcggg aagggactgg ctgctattgg gcgaagtgcc ggggcaggat
3121 ctcctgtcat ctcaccttgc tcctgccgag aaagtatcca tcatggctga tgcaatgcgg
3181 cggctgcata cgcttgatcc ggctacctgc ccattcgacc accaagcgaa acatcgcatc
3241 gagcgagcac gtactcggat ggaagccggt cttgtcgatc aggatgatct ggacgaagag
3301 catcaggggc tcgcgccagc cgaactgttc gccaggctca aggcgcgcat gcccgacggc
3361 gaggatctcg tcgtgaccca tggcgatgcc tgcttgccga atatcatggt ggaaaatggc
3421 cgcttttctg gattcatcga ctgtggccgg ctgggtgtgg cggaccgcta tcaggacata
3481 gcgttggcta cccgtgatat tgctgaagag cttggcggcg aatgggctga ccgcttcctc
3541 gtgctttacg gtatcgccgc tcccgattcg cagcgcatcg ccttctatcg ccttcttgac
3601 gagttcttct gagcgggact ctggggttcg aaatgaccga ccaagcgacg cccaacctgc
3661 catcacgaga tttcgattcc accgccgcct tctatgaaag gttgggcttc ggaatcgttt
3721 tccgggacgc cggctggatg atcctccagc gcggggatct catgctggag ttcttcgccc
3781 accccaactt gtttattgca gcttataatg gttacaaata aagcaatagc atcacaaatt
3841 tcacaaataa agcatttttt tcactgcatt ctagttgtgg tttgtccaaa ctcatcaatg
3901 tatcttatca tgtctgtata ccgtcgacct ctagctagag cttggcgtaa tcatggtcat
3961 agctgtttcc tgtgtgaaat tgttatccgc tcacaattcc acacaacata cgagccggaa
4021 gcataaagtg taaagcctgg ggtgcctaat gagtgagcta actcacatta attgcgttgc
4081 gctcactgcc cgctttccag tcgggaaacc tgtcgtgcca gctgcattaa tgaatcggcc
4141 aacgcgcggg gagaggcggt ttgcgtattg ggcgctcttc cgcttcctcg ctcactgact
4201 cgctgcgctc ggtcgttcgg ctgcggcgag cggtatcagc tcactcaaag gcggtaatac
4261 ggttatccac agaatcaggg gataacgcag gaaagaacat gtgagcaaaa ggccagcaaa
4321 aggccaggaa ccgtaaaaag gccgcgttgc tggcgttttt ccataggctc cgcccccctg
4381 acgagcatca caaaaatcga cgctcaagtc agaggtggcg aaacccgaca ggactataaa
4441 gataccaggc gtttccccct ggaagctccc tcgtgcgctc tcctgttccg accctgccgc
4501 ttaccggata cctgtccgcc tttctccctt cgggaagcgt ggcgctttct catagctcac
4561 gctgtaggta tctcagttcg gtgtaggtcg ttcgctccaa gctgggctgt gtgcacgaac
4621 cccccgttca gcccgaccgc tgcgccttat ccggtaacta tcgtcttgag tccaacccgg
4681 taagacacga cttatcgcca ctggcagcag ccactggtaa caggattagc agagcgaggt
4741 atgtaggcgg tgctacagag ttcttgaagt ggtggcctaa ctacggctac actagaagaa
4801 cagtatttgg tatctgcgct ctgctgaagc cagttacctt cggaaaaaga gttggtagct
4861 cttgatccgg caaacaaacc accgctggta gcggtttttt tgtttgcaag cagcagatta
4921 cgcgcagaaa aaaaggatct caagaagatc ctttgatctt ttctacgggg tctgacgctc
4981 agtggaacga aaactcacgt taagggattt tggtcatgag attatcaaaa aggatcttca
5041 cctagatcct tttaaattaa aaatgaagtt ttaaatcaat ctaaagtata tatgagtaaa
5101 cttggtctga cagttaccaa tgcttaatca gtgaggcacc tatctcagcg atctgtctat
5161 ttcgttcatc catagttgcc tgactccccg tcgtgtagat aactacgata cgggagggct
5221 taccatctgg ccccagtgct gcaatgatac cgcgagaccc acgctcaccg gctccagatt
5281 tatcagcaat aaaccagcca gccggaaggg ccgagcgcag aagtggtcct gcaactttat
5341 ccgcctccat ccagtctatt aattgttgcc gggaagctag agtaagtagt tcgccagtta
5401 atagtttgcg caacgttgtt gccattgcta caggcatcgt ggtgtcacgc tcgtcgtttg
5461 gtatggcttc attcagctcc ggttcccaac gatcaaggcg agttacatga tcccccatgt
5521 tgtgcaaaaa agcggttagc tccttcggtc ctccgatcgt tgtcagaagt aagttggccg
5581 cagtgttatc actcatggtt atggcagcac tgcataattc tcttactgtc atgccatccg
5641 taagatgctt ttctgtgact ggtgagtact caaccaagtc attctgagaa tagtgtatgc
5701 ggcgaccgag ttgctcttgc ccggcgtcaa tacgggataa taccgcgcca catagcagaa
5761 ctttaaaagt gctcatcatt ggaaaacgtt cttcggggcg aaaactctca aggatcttac
5821 cgctgttgag atccagttcg atgtaaccca ctcgtgcacc caactgatct tcagcatctt
5881 ttactttcac cagcgtttct gggtgagcaa aaacaggaag gcaaaatgcc gcaaaaaagg
5941 gaataagggc gacacggaaa tgttgaatac tcatactctt cctttttcaa tattattgaa
6001 gcatttatca gggttattgt ctcatgagcg gatacatatt tgaatgtatt tagaaaaata
6061 aacaaatagg ggttccgcgc acatttcccc gaaaagtgcc acctgacgtc
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pCDNA3.1-FLAG-Rnd1人源基因质粒
别称: ARHS;RHO6;RHOS
启动子: CMV
质粒分类: 基因文库质粒
复制子: pUC
原核抗性: Amp
筛选标记: G418
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：哺乳细胞
载体用途：蛋白表达
基因种属：人
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：Neo/G418
荧光蛋白：
质粒简介
Homo sapiens Rho family GTPase 1。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 6110 bp ds-DNA circular SYN 27-FEB-2018
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..6110
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
enhancer 235..614
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 615..818
/label=CMV promoter
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
promoter 863..881
/label=T7 promoter
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
CDS 944..967
/codon_start=1
/product="FLAG(R) epitope tag, followed by an enterokinase
cleavage site"
/label=FLAG
/translation="DYKDDDDK"
CDS 968..1666
/codon_start=1
/label=Rnd1
/translation="MKERRAPQPVVARCKLVLVGDVQCGKTAMLQVLAKDCYPETYVPT
VFENYTACLETEEQRVELSLWDTSGSPYYDNVRPLCYSDSDAVLLCFDISRPETVDSAL
KKWRTEILDYCPSTRVLLIGCKTDLRTDLSTLMELSHQKQAPISYEQGCAIAKQLGAEI
YLEGSAFTSEKSIHSIFRTASMLCLNKPSPLPQKSPVRSLSKRLLHLPSRSELISSTFK
KEKAKSCSIM"
polyA_signal 1710..1934
/label=bGH poly(A) signal
/note="bovine growth hormone polyadenylation signal"
rep_origin 1980..2408
/direction=RIGHT
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 2422..2751
/label=SV40 promoter
/note="SV40 enhancer and early promoter"
CDS 2818..3612
/codon_start=1
/gene="aph(3')-II (or nptII)"
/product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"
/label=Neo
/note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418
(Geneticin(R))"
/translation="MIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGRP
VLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLLS
SHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPATC-PFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEHQ
GLAPAELFARLKARMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA
LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"
polyA_signal 3786..3907
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
protein_bind 3980..3996
/label=lac operator
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
promoter complement(4004..4034)
/label=lac promoter
/note="promoter for the E. coli lac operon"
protein_bind 4049..4070
/label=CAP binding site
/bound_moiety="E. coli catabolite activator protein"
/note="CAP binding activates transcription in the presence
of cAMP."
rep_origin complement(4358..4943)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(5114..5974)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(5975..6079)
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
ORIGIN
1 gacggatcgg gagatctccc gatcccctat ggtgcactct cagtacaatc tgctctgatg
61 ccgcatagtt aagccagtat ctgctccctg cttgtgtgtt ggaggtcgct gagtagtgcg
121 cgagcaaaat ttaagctaca acaaggcaag gcttgaccga caattgcatg aagaatctgc
181 ttagggttag gcgttttgcg ctgcttcgcg atgtacgggc cagatatacg cgttgacatt
241 gattattgac tagttattaa tagtaatcaa ttacggggtc attagttcat agcccatata
301 tggagttccg cgttacataa cttacggtaa atggcccgcc tggctgaccg cccaacgacc
361 cccgcccatt gacgtcaata atgacgtatg ttcccatagt aacgccaata gggactttcc
421 attgacgtca atgggtggag tatttacggt aaactgccca cttggcagta catcaagtgt
481 atcatatgcc aagtacgccc cctattgacg tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt
541 atgcccagta catgacctta tgggactttc ctacttggca gtacatctac gtattagtca
601 tcgctattac catggtgatg cggttttggc agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg
661 actcacgggg atttccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc
721 aaaatcaacg ggactttcca aaatgtcgta acaactccgc cccattgacg caaatgggcg
781 gtaggcgtgt acggtgggag gtctatataa gcagagctct ctggctaact agagaaccca
841 ctgcttactg gcttatcgaa attaatacga ctcactatag ggagacccaa gctggctagc
901 gtttaaactt aagcttggta ccgagctcgg atccgccacc atggactaca aggacgacga
961 tgataagatg aaggagagac gggcccccca gccagtcgtg gccagatgta agctcgttct
1021 ggtcggggac gtgcagtgtg ggaagaccgc gatgttgcaa gtgttagcga aggattgcta
1081 tccagagacc tatgtgccca ccgtgttcga aaattacaca gcctgtttgg agacagagga
1141 acagagggtg gagcttagtc tctgggatac ctcaggatct ccctactacg ataatgtccg
1201 tccactctgc tacagcgact cggatgcagt attactatgt tttgacatca gccgtccaga
1261 gacagtggac agcgcactga agaagtggag gacagaaatc ctagattatt gtcccagcac
1321 ccgcgttttg ctcattggct gcaagacaga cctgcgaaca gacctgagta ctctgatgga
1381 gctgtcccac cagaagcagg cgcccatctc ctatgagcag ggttgtgcaa tagcaaagca
1441 gctgggtgca gaaatctacc tggaaggctc agctttcacc tcagaaaaga gcatccacag
1501 catctttcgg acggcatcca tgctgtgtct gaacaagcct agcccactgc cccagaagag
1561 ccctgtccga agcctctcca aacgactgct ccacctcccc agtcgctctg aactcatctc
1621 ttctaccttc aagaaggaaa aggccaaaag ctgttccatt atgtgactcg agtctagagg
1681 gcccgtttaa acccgctgat cagcctcgac tgtgccttct agttgccagc catctgttgt
1741 ttgcccctcc cccgtgcctt ccttgaccct ggaaggtgcc actcccactg tcctttccta
1801 ataaaatgag gaaattgcat cgcattgtct gagtaggtgt cattctattc tggggggtgg
1861 ggtggggcag gacagcaagg gggaggattg ggaagacaat agcaggcatg ctggggatgc
1921 ggtgggctct atggcttctg aggcggaaag aaccagctgg ggctctaggg ggtatcccca
1981 cgcgccctgt agcggcgcat taagcgcggc gggtgtggtg gttacgcgca gcgtgaccgc
2041 tacacttgcc agcgccctag cgcccgctcc tttcgctttc ttcccttcct ttctcgccac
2101 gttcgccggc tttccccgtc aagctctaaa tcgggggctc cctttagggt tccgatttag
2161 tgctttacgg cacctcgacc ccaaaaaact tgattagggt gatggttcac gtagtgggcc
2221 atcgccctga tagacggttt ttcgcccttt gacgttggag tccacgttct ttaatagtgg
2281 actcttgttc caaactggaa caacactcaa ccctatctcg gtctattctt ttgatttata
2341 agggattttg ccgatttcgg cctattggtt aaaaaatgag ctgatttaac aaaaatttaa
2401 cgcgaattaa ttctgtggaa tgtgtgtcag ttagggtgtg gaaagtcccc aggctcccca
2461 gcaggcagaa gtatgcaaag catgcatctc aattagtcag caaccaggtg tggaaagtcc
2521 ccaggctccc cagcaggcag aagtatgcaa agcatgcatc tcaattagtc agcaaccata
2581 gtcccgcccc taactccgcc catcccgccc ctaactccgc ccagttccgc ccattctccg
2641 ccccatggct gactaatttt ttttatttat gcagaggccg aggccgcctc tgcctctgag
2701 ctattccaga agtagtgagg aggctttttt ggaggcctag gcttttgcaa aaagctcccg
2761 ggagcttgta tatccatttt cggatctgat caagagacag gatgaggatc gtttcgcatg
2821 attgaacaag atggattgca cgcaggttct ccggccgctt gggtggagag gctattcggc
2881 tatgactggg cacaacagac aatcggctgc tctgatgccg ccgtgttccg gctgtcagcg
2941 caggggcgcc cggttctttt tgtcaagacc gacctgtccg gtgccctgaa tgaactgcag
3001 gacgaggcag cgcggctatc gtggctggcc acgacgggcg ttccttgcgc agctgtgctc
3061 gacgttgtca ctgaagcggg aagggactgg ctgctattgg gcgaagtgcc ggggcaggat
3121 ctcctgtcat ctcaccttgc tcctgccgag aaagtatcca tcatggctga tgcaatgcgg
3181 cggctgcata cgcttgatcc ggctacctgc ccattcgacc accaagcgaa acatcgcatc
3241 gagcgagcac gtactcggat ggaagccggt cttgtcgatc aggatgatct ggacgaagag
3301 catcaggggc tcgcgccagc cgaactgttc gccaggctca aggcgcgcat gcccgacggc
3361 gaggatctcg tcgtgaccca tggcgatgcc tgcttgccga atatcatggt ggaaaatggc
3421 cgcttttctg gattcatcga ctgtggccgg ctgggtgtgg cggaccgcta tcaggacata
3481 gcgttggcta cccgtgatat tgctgaagag cttggcggcg aatgggctga ccgcttcctc
3541 gtgctttacg gtatcgccgc tcccgattcg cagcgcatcg ccttctatcg ccttcttgac
3601 gagttcttct gagcgggact ctggggttcg aaatgaccga ccaagcgacg cccaacctgc
3661 catcacgaga tttcgattcc accgccgcct tctatgaaag gttgggcttc ggaatcgttt
3721 tccgggacgc cggctggatg atcctccagc gcggggatct catgctggag ttcttcgccc
3781 accccaactt gtttattgca gcttataatg gttacaaata aagcaatagc atcacaaatt
3841 tcacaaataa agcatttttt tcactgcatt ctagttgtgg tttgtccaaa ctcatcaatg
3901 tatcttatca tgtctgtata ccgtcgacct ctagctagag cttggcgtaa tcatggtcat
3961 agctgtttcc tgtgtgaaat tgttatccgc tcacaattcc acacaacata cgagccggaa
4021 gcataaagtg taaagcctgg ggtgcctaat gagtgagcta actcacatta attgcgttgc
4081 gctcactgcc cgctttccag tcgggaaacc tgtcgtgcca gctgcattaa tgaatcggcc
4141 aacgcgcggg gagaggcggt ttgcgtattg ggcgctcttc cgcttcctcg ctcactgact
4201 cgctgcgctc ggtcgttcgg ctgcggcgag cggtatcagc tcactcaaag gcggtaatac
4261 ggttatccac agaatcaggg gataacgcag gaaagaacat gtgagcaaaa ggccagcaaa
4321 aggccaggaa ccgtaaaaag gccgcgttgc tggcgttttt ccataggctc cgcccccctg
4381 acgagcatca caaaaatcga cgctcaagtc agaggtggcg aaacccgaca ggactataaa
4441 gataccaggc gtttccccct ggaagctccc tcgtgcgctc tcctgttccg accctgccgc
4501 ttaccggata cctgtccgcc tttctccctt cgggaagcgt ggcgctttct catagctcac
4561 gctgtaggta tctcagttcg gtgtaggtcg ttcgctccaa gctgggctgt gtgcacgaac
4621 cccccgttca gcccgaccgc tgcgccttat ccggtaacta tcgtcttgag tccaacccgg
4681 taagacacga cttatcgcca ctggcagcag ccactggtaa caggattagc agagcgaggt
4741 atgtaggcgg tgctacagag ttcttgaagt ggtggcctaa ctacggctac actagaagaa
4801 cagtatttgg tatctgcgct ctgctgaagc cagttacctt cggaaaaaga gttggtagct
4861 cttgatccgg caaacaaacc accgctggta gcggtttttt tgtttgcaag cagcagatta
4921 cgcgcagaaa aaaaggatct caagaagatc ctttgatctt ttctacgggg tctgacgctc
4981 agtggaacga aaactcacgt taagggattt tggtcatgag attatcaaaa aggatcttca
5041 cctagatcct tttaaattaa aaatgaagtt ttaaatcaat ctaaagtata tatgagtaaa
5101 cttggtctga cagttaccaa tgcttaatca gtgaggcacc tatctcagcg atctgtctat
5161 ttcgttcatc catagttgcc tgactccccg tcgtgtagat aactacgata cgggagggct
5221 taccatctgg ccccagtgct gcaatgatac cgcgagaccc acgctcaccg gctccagatt
5281 tatcagcaat aaaccagcca gccggaaggg ccgagcgcag aagtggtcct gcaactttat
5341 ccgcctccat ccagtctatt aattgttgcc gggaagctag agtaagtagt tcgccagtta
5401 atagtttgcg caacgttgtt gccattgcta caggcatcgt ggtgtcacgc tcgtcgtttg
5461 gtatggcttc attcagctcc ggttcccaac gatcaaggcg agttacatga tcccccatgt
5521 tgtgcaaaaa agcggttagc tccttcggtc ctccgatcgt tgtcagaagt aagttggccg
5581 cagtgttatc actcatggtt atggcagcac tgcataattc tcttactgtc atgccatccg
5641 taagatgctt ttctgtgact ggtgagtact caaccaagtc attctgagaa tagtgtatgc
5701 ggcgaccgag ttgctcttgc ccggcgtcaa tacgggataa taccgcgcca catagcagaa
5761 ctttaaaagt gctcatcatt ggaaaacgtt cttcggggcg aaaactctca aggatcttac
5821 cgctgttgag atccagttcg atgtaaccca ctcgtgcacc caactgatct tcagcatctt
5881 ttactttcac cagcgtttct gggtgagcaa aaacaggaag gcaaaatgcc gcaaaaaagg
5941 gaataagggc gacacggaaa tgttgaatac tcatactctt cctttttcaa tattattgaa
6001 gcatttatca gggttattgt ctcatgagcg gatacatatt tgaatgtatt tagaaaaata
6061 aacaaatagg ggttccgcgc acatttcccc gaaaagtgcc acctgacgtc
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P4907/pCMV-SPORT6-WDR26（850-1986bp）人源基因质粒 |
| P4908/pCMV-SPORT6-MEMO1人源基因质粒 |
| P4909/pCMV-SPORT6-FAM131A人源基因质粒 |
| P4910/pCMV-SPORT6-CA10人源基因质粒 |
| P4911/pCMV-SPORT6-ARHGEF1人源基因质粒 |
| P4912/pCMV-SPORT6-POR人源基因质粒 |
| P4913/pCMV-SPORT6-TM7SF2人源基因质粒 |
| P4914/pCMV-SPORT6-GPC4人源基因质粒 |
| P4915/pCMV-SPORT6-ATCAY人源基因质粒 |
| P4916/pCMV-SPORT6-NEU4人源基因质粒 |
| P4917/pCMV-SPORT6-FGFR1人源基因质粒 |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验相关实验
表达载体的构建方法及步骤 一、载体的选择及如何阅读质粒图谱 目前，载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒 DNA 是一种新的非病毒转基因载体。 一个合格质粒的组成要素： （1）复制起始位点 Ori 即控制复制起始的位点。原核生物 DNA 分子中只有一个复制起始点。而 真核生物 DNA 分子有多个复制起始位点。 （2）抗生素抗性基因可以便于加以检测，如 Amp+ ,Kan+ （3）多克隆位点 MCS 克隆携带外源基因片段 （4） P/E 启动子/增强
非病毒载体介导的基因治疗有许多优点，但就目前大多数表达体系而言普遍存在外源基因表达水平低而短暂等问题为了使外源基因稳定持续表达，必须对质粒DNA 进行改造。附着体质粒载体(episomal vector)可以使外源基因以附着体形式复制，分离到子代细胞，从而使基因高效持续表达，是种新型的非病毒表达载体 。 我们构建了以EB病毒(Epstein Barr virus，EBV)复制子(EBV replicon，EBVR)为基础的附着体质粒载体，并将报告基因增强型绿色
【求助】逆转录病毒、慢病毒载体与其他真核表达载体在稳定筛选时的区别？
roy_liu823 逆转录病毒和慢病毒载体经包装后可以得到携带外源基因的病毒，将病毒感染细胞后，外源基因可以整合到细胞基因组中，经过稳定的筛选后，就可以得到稳定表达外源基因的细胞。 而一些真核表达载体如pcDNA3.1经脂质体转染进细胞后，也可以整合到细胞基因组中，并经过G418的筛选后，也可以得到稳定表达外源基因的细胞。我就很困惑：这两者有什么区别？用逆转录病毒或慢病毒载体的优势在哪？如果我想得到能稳定表达某一基因的骨髓基质干细胞，是不是用pcDNA3
pCDNA3.1-FLAG-Rnd1人源基因质粒
￥100 - 1000
