pCR4-TOPO-C20orf96（2同义突变）人源基因质

基本信息
名称：pCR4-TOPO-C20orf96（2同义突变）人源基因质粒
别称: NM_153269.2;dJ1103G7.2
复制子: pUC
原核抗性: Amp
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度

质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：PCR模板
基因种属：人
基因类型：cDNA
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光蛋白：

质粒简介
   pCR4-TOPO-C20orf96（2个同义突变）人源基因质粒。

质粒图谱


质粒序列
测序所得部分序列：
        1 aaagaactta tagtttactc aagctatgca tcaagcttgg taccgagctc ggatccacta
       61 gtaacggccg ccagtgtgct ggaattcgcc ctttcgggac ttctgagtgg cctgggttac
      121 cgcgcgatct acactgagac aaggaagttg gaaaagccga gtagttatac cagaagatca
      181 gggtctcaca gactcgcaac ttctcttcca ttttccccaa tggcgcatgt cttacaaaaa
      241 cccaagcact ctgggactca ctccatagtc caggagttcc aggttccgga ttatgttcca
      301 tggcagcagt ccaagcagga aaccaagcca tctactctgc ctccagtcca acaagccaac
      361 agccttcata caagcaaaat gaagactttg actagggtcc aaccagtgtt tcacttcaag
      421 cccactacgg tggtgacaag ctgccagccg aagaatccaa gagaactaca tagaaggcgg
      481 aagttggacc ctgggaagat gcatgccaaa atctggttaa tgaagacctc gctcaggagc
      541 gggagggccg ctctgcgaga gctccgaagc cgtgagaact tcctcagcaa gctcaaccgg
      601 gagctgatcg agaccatcca ggagatggag aacagcacga ccctgcacgt gcgggccctg
      661 ctgcagcagc aggacacctt ggcgaccatc atcgacatct tggagtactc aaacaagaag
      721 aggctgcagc aattgaaatc tgagcttcag gagtgggaag aaaagaagaa atgcaagatg
      781 agctatcttg agcagcaggc agagcagctg aatgccaaga ttgagaagac ccaggaggaa
      841 gtgaacttcc tgagcactta tatggaccat gagtattcca tcaagtctgt ccagatctcc
      901 actcttatgc gccagctgca gcaggttaag gacagccagc aggatgagct ggatgacctc
      961 ggtgagatgc gcagaaaggt cctggaatcc ttgtctgaca agattcagaa gaagaagaaa
     1021 aaaattctga gttctgtggt ggcggaaacc cagcgtccct atgaagaggc tctcctacag
     1081 aagatgtggg aaagccagga cttcctgaaa tgcatgcaaa ggttcagaga aattattgac
     1141 cagtttgagg agaacatgcc tgtattaagg gccgaggtgg aagagctcca agcccagacc
     1201 cgggaacccc gagaggtcat atttgaggat gttctgcttc ggagacccaa gtgcacccca
     1261 gacatggatg tcatcctcaa cattcctgtg gaagagccac tacccttcta gatggcagtg
     1321 ccatgggccg ccctcccctc ctgctctctt cccaaaaaaa caagggcgaa ttctgcagat
     1381 atccatcaca ctggcggccg ctcgagcatg catctagagg gcccaa
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质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
         收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
         1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
              ①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
              ②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
              ③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
              ④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
              ⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
              ⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
        2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
              四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
        3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
              穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
        4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
              直接挑取单菌落至液体培养基中。
        5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
              单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
        6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
              收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。

二、转化图片

P3817/pCMV-SPORT6-GDAP1L1人源基因质粒

P3818/pCMV-SPORT6-ARNTL2人源基因质粒

P3821/pCMV-SPORT6-FAM184A人源基因质粒

P3822/pCMV-SPORT6-GALNT15（1同义突变）

P3823/pCMV-SPORT6-ZC2HC1A人源基因质粒

P0637/pCR4-MME人源基因质粒

P0645/pCR4-IL12A人源基因质粒

P0646/pCR4-PKD2人源基因质粒

P4957/pCR-XL-TOPO-EFCAB4B人源基因质粒

P0647/pDNR-Dual-IL12B人源基因质粒

P4822/pDNR-LIB-PABPN1（2点突变）人源基因质粒

P2411/pOTB7-LILRB1人源基因质粒