【STR鉴定】HCCLM3、HCCLM3细胞、HCCLM3高

【STR鉴定】HCCLM3、HCCLM3细胞、HCCLM3高转移肝癌细胞

细胞名称：HCCLM3人高转移肝癌细胞

代次：P3

规格:T25

细胞数:1x10^6 cells

细胞形态:贴壁

细胞活力：95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

细胞检测：细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌

培养条件：DMEM （高糖）+10% FBS；37℃，5% CO2

复苏:
1.从液氮中取出细胞冻存管，快速将其置入37°C 水浴中解冻直至冻存管中无结
晶，75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2.将冻存管中的细胞移至含6ml完全培养基的15ml离心管中，1000rpm 离心
5min;
3.弃上清,沉淀用6ml 完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶，于37°C,5%C02 细
胞培养箱中培养。
传代: .
(1)贴壁细胞:
1.细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS
清洗细胞一次;
2.添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞
回缩变圆后加入5ml 完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落将悬液转
移至15ml离心管中，1000rpm 离心5min;
3.弃上清，沉淀细胞用1-2m1 完全培养基重悬,按1:2 比例进行分瓶传代，补加
培养基后放入37° C，5%C02细胞培养箱中培养。
(2)悬浮细胞:
待细胞达到1x10~6/ml 左右可按照以下方法换液培养或传代。
方法@:收集细胞，1000rpm 离心5min， 弃去上清液，补加1-2mL 培养液后吹
匀，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到含培养基的新瓶中。
方法②:竖立放置培养瓶，细胞沉淀后弃去上半量培养基,将细胞悬液按1:2到1:
3的比例分到含培养基的新瓶中。