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【STR鉴定】OVCAR-8、OVCAR-8细胞、OVCAR-8卵巢癌细胞细胞培养
单层冻干管的开启和菌种复苏方法
1、消毒:用浸过 70 %酒精的脱脂棉擦净安瓿管。
2、将冻干管尖端放在火焰上加热
3、滴少量无菌水至加热处使之破裂
4、用锉刀或镊子轻轻敲下安瓿管顶端,并将冻干管
5、用无菌吸管吸取0.1ml-0.2ml 无菌水或适宜开口处在火焰上过一遍,并保持在火焰旁操作 的液体培养基,滴入管内
6、待安瓿管内的牛奶菌粉溶解呈悬浮状,再用无菌吸管,吸取全部菌悬液接在1-2支建议的斜面培养基或者1个建议的平板培养基上,并在建议的温度下培养
7、注意事项:
① 菌种活化前,如要长期保藏,请将安瓿管保存在4-10℃的环境下。
② 此冻干菌种是经冷冻干燥并抽真空保存的,开启后必须一次使用完,不能留菌粉下次再用;
另外,安瓿管里大部份是用牛奶做为保护剂,里边菌体为少数,复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上,否则可能造成复苏不成功。
③ 冻干菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态,有时延滞期较长,如在说明书建议的培养时间 还未长起来,请继续在相应的环境下多培养24小时或更长时间,直至菌种培养完成;有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长,一般来说,菌种培养稳定后才能用于您的后续实验;
④ 打开冻干管时应由专业的微生物技术人员在相应防护设备中进行,生物危害程度为三类的
菌种应在生物安全柜中操作,开管中注意远离面部,谨防玻璃碎片飞入眼。
⑤ 以上开管操作时应在托盘上方进行,用完的冻干管和接触菌的东西应灭菌后再处理;复苏时如有任何不明之处请尽早咨询我司工作人员。
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139 人阅读发布时间:2016-12-14 18:57
245 人阅读发布时间:2021-09-12 16:33
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