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- 2025年06月29日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
cell
- 库存：
10
- 细胞形态：
上皮/成纤维/淋巴样
- 运输方式：
顺丰快递
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1×10^6/T25瓶
产品规格：复苏发货，1×10^6/T25瓶
细胞收到后处理：细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作，培养箱静置2-4小时。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液收集至离心管中，加入6ml完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。
（注意发货的是密封培养瓶的话，放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松，传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基，另外一瓶用自己配的完全培养基）
Huh7.5人肝癌细胞说明，由我公司出售的人源细胞基本都有STR，动物源细胞没有数据库所以动物细胞是没有STR的，如下图人SU-DHL-4细胞STR检测报告：
在我公司购买细胞也可以索取该细胞正常图，以下图示H69细胞和HCM3细胞为例：
培养步骤： 一、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
a）、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b）、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右完全培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。
三、细胞冻存：（注：非无血清冻存液方法，无血清冻存液方法请参考我司官网货号：C7001）
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
3、用适量的冻存液重悬细胞，并放置于冻存管中；
4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃。
如需更多相关细胞，请咨询我们：Huh7.5人肝癌细胞
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文献和实验wj1989113 最近一直在做慢病毒载体，用的是第二代的三质粒系统，目的片段是一个肝细胞的转录因子。载体构建好之后，包装了一批病毒。然后拿慢病毒感染肝癌细胞株3B和Huh7细胞，想通过PCR和Western验证病毒的表达情况。出现了一些问题： 1、每次拿慢病毒感染肝癌细胞株，荧光都很亮，但是做PCR或者Western之后，加对照病毒GFP组的细胞和目的病毒无差异。（条带都较亮）尤其是Western，几乎没有差异。 2、感染
学问题。 案例一：多组学分析揭示肝癌起始细胞免疫逃逸机制和精准治疗策略 发表期刊：Cancer Cell 影响因子：44.5 发表时间：2024 年 12 月 研究疾病：肝细胞癌（Hepatocellular Carcinoma,HCC） 样本类型：患者来源的肝癌类器官（HCC organoids），肝癌细胞系（Hep3B,Huh7,PLC/PRF/5, MHCC97 H,Hep53.4）和小鼠模型（包括自发性肝癌模型和异种移植模型） 样本数量：11 个 HCC 类器官样本，4 个肝癌细胞系样本
、技术意义： • 文章以Huh7人肝癌细胞代表转化细胞，以人胎肝原代培养细胞（HFH）和HH4人肝细胞系（来自永生化的胎肝细胞系）代表非转化细胞，抽提这些细胞并进行了蛋白质组学分析。这些细胞受激后的和非受激对照细胞的蛋白提取物都进行了ICAT标记，然后进行胰酶酶解、过阳离子交换柱以及亲合素亲合色谱柱。最后含有半胱氨酸的肽段通过毛细管液相色谱—串联质谱（MS/MS）进行分析。 • 质谱数据通过SEQUEST软件搜索IPI (v2.28)数据库，接下来采用新的统计学算法对每个实验的SEQUEST搜索
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