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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
cell
- 库存:
10
- 细胞形态:
上皮/成纤维/淋巴样
- 运输方式:
顺丰快递
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1×10^6/T25瓶
产品规格:复苏发货,1×10^6/T25瓶
细胞收到后处理:细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作,培养箱静置2-4小时。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液收集至离心管中,加入6ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。
(注意发货的是密封培养瓶的话,放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松,传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基,另外一瓶用自己配的完全培养基)
GC-2小鼠精原细胞系说明,由我公司出售的人源细胞基本都有STR,动物源细胞没有数据库所以动物细胞是没有STR的,如下图人SU-DHL-4细胞STR检测报告:

在我公司购买细胞也可以索取该细胞正常图,以下图示H69细胞和HCM3细胞为例:

培养步骤: 一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。
三、细胞冻存:(注:非无血清冻存液方法,无血清冻存液方法请参考我司官网货号:C7001)
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3、用适量的冻存液重悬细胞,并放置于冻存管中;
4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃。
如需更多相关细胞,请咨询我们:GC-2小鼠精原细胞系
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文献和实验讨 论 1.小鼠生殖细胞单细胞悬液制备的影响因素 良好单细胞悬液的制备必须首先考虑所用小鼠的日龄。因为随动物日龄的增加,精原细胞开始分化形成各级生殖细胞,其绝对数目及所占生殖细胞的比例都逐渐下降,会给分离纯化增加困难。在成年小鼠的睾丸中,A型精原细胞只占所有精原细胞的1.25%,占未分化精原细胞的10.6%,仅占所有生殖细胞的0.03%[5] 。因而用来分离精原细胞的动物的日龄应较小为好。一般小鼠选用生后8d的[2] ,但也有人选用生后10d的;大鼠则选用生后9d的[6]
相关专题 以下是根据NIH老年病研究所 提供的英文的R1胚胎干细胞培养protocol整理而成。根据经验作部分修改。 1、一般培养:保持胚胎干细胞 处于未分化状态 培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代 2 、体外分化 培养基包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板(使用或不使用盖玻片) 体外分化方法 注:以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系,其它胚胎
【求助】表达TLR4,MYD88,TBK1的人和小鼠的肿瘤细胞系
zcx7792 哪些人和小鼠的肿瘤细胞系表达TLR4,MYD88,TBK1? 哪位高手知道?不甚感激。 zcx7792 自己顶一下 lagopsis SKOV3 livelyding 胰腺癌细胞株 zcx7792 非常感谢二位 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫
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