1. 编号:取无菌平皿9套,分别用记号笔标明10-4、10-5、10-6各3套。另取6支盛有4.5 ml 无菌水的试管,排列于试管架上,依次标明10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6。
2. 稀释:用1 ml 无菌吸管精确地吸取0.5 ml 大肠杆菌悬液放入10-1的试管中,注意吸管尖端不要碰到液面,以免吹出时,管内液体外溢。然后仍用此吸管将管内悬液来回吸吹三次,吸时伸入管底,吹时离开水面,使其混合均匀。另取一支吸管自10-1试管吸0.5 ml 放入10-2试管中,吸吹三次,其余依次类推。
3. 取样:用3支1 ml 无菌吸管分别精确地吸取10-4、10-5、10-6的稀释菌液0.2 ml,对号放入编好号的无菌培养皿中。
平板菌蓓计数法的操作除上述的以外,还可用涂布平板的方法进行。二者操作基本相同,所不同的是涂布平板法是先将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基溶化后倒平板,待凝固后编号,并于37℃温室中烘烤30分钟左右,使其干燥,然后用无菌吸管吸取0.2 ml 菌液对号接种于不同稀释度编号的培养皿中的培养基上,再用无菌玻璃刮棒将菌液在平板上涂布均匀,平放于实验台上20~30分钟,使菌液渗透入培养基内,然后再倒置于37℃的温室中培养。