关键词: 哺乳动物 转录 调控
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转录调控研究包括启动子、增强子的研究,具体内容如下。
1 启动子——基因序列 中决定转录起始的部位
1)转录起始位点(TSS)的确定
a)生物信息学 预测TSS
①预测转录起始位点和启动子区域
②预测CpG岛
b)5’-RAce 初步确定TSS的大概位置
5'RLM-RACE
c)引物延伸、核酸酶 保护或S1作图精确定位TSS
引物延伸及s1核酸酶 保护
2)启动子区域(顺式作用元件)的确定
a)生物信息 学预测启动子区域
b)克隆5’-flanking sequence,并连接到报告基因 载体中
c)缺失、突变
d)荧光素酶活性分析
e)确定转录调控区域(启动子区域)
3)转录因子(反式作用元件)结合位点的确定
a)生物信息学预测转录因子结合位点
b)实验证实转录因子结合位点:EMSA,ChIP,DNase I足迹分析
DNase I足迹分析
4)反式作用元件和顺式作用元件相互作用对基因转录的影响
a)定点突变:荧光素酶活性分析
b)过表达转录因子:测定目的基因的表达
c)干扰转录因子的表达:测定目的基因的表达
d)转基因动物
2 增强子——基因组中能增强邻近基因启动转录的序列
1)瞬时转染——Luciferase萤光素酶法
2)DNAase I hypersensitivity
3)DNAase I footprinting/mutation analysis
4)转基因动物
标签: 广州赛诚生物 哺乳动物转录调控
作者:Snail 点击: 次
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微球菌核酸酶实验DNA 电泳一直观察不到200bp
有人做过么?想交流一下
1 评论
请教各位大佬
具体研磨液配制的比例是多少?
楼主,那么多注释没有写明白哦,谢谢分享
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