包涵体的纯化
包涵体是外源基因在原核细胞中表达时,尤其在大肠杆菌中高效表达时,形成的由膜包裹的高密度、不溶性蛋白质颗粒,在显微镜下观察时为高折射区,与胞质中其他成分有明显区别。
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葡聚糖凝胶柱使用及注意事项
葡聚糖凝胶柱使用及注意事项1 Sephadex G型葡聚糖凝胶只适合在水中使用,Sephadex G-25羟丙化后就是Sephadex LH-20。其既有分子筛作用,在由极性与非极性溶剂组成的溶剂中还有反相层析效果。虽然价位很高,但由于性能颇佳,可再生利用,所以倍受亲睐。此外上柱样品损失很少,对处理小样品较好,这也是我们实验室常用的原因之一。2 Sephadex LH20 的原理。 Seph ...
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植物蛋白质提取方法总汇
一、植物组织蛋白质提取方法 1、根据样品重量(1g样品加入3.5ml提取液,可根据材料不同适当加入),准备提取液放在冰上。2、把样品放在研钵中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上静置(3-4小时)。3、用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清液,样品制备完成。蛋白质提取液:300ml1、1Mtris-HCl(pH8)45ml2、甘油(Gly ...
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镍柱的清洗和保养
今天为大家带来镍柱的保养和清洗建议。Ni柱的使用与保养1. 对于一般的预装柱(Crude系列除外),上样前,样品需要使用0.22μm/0.45μm滤膜进行过滤或者离心处理,以避免样品中有细胞碎片等固体物质,堵塞柱子。2. 如果细胞裂解后非常粘稠,需考虑是否因为DNA、RNA这类核酸物质过多,需要加入核酸酶去除,以降低样品粘稠度,提高上样速度及洗脱效果。3. 柱子使用过程中,不能超过填料的压力,以免填料被压塌。4. 每次使用后,可使用5-1 ...
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