关键词: RNA 脂肪组织
来源: 净信
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前言RNA 的提取是肿瘤研究的重要内容。在乳腺癌的研究中,乳腺癌样品通常含有较高含量的脂肪组织和结缔组织,而脂肪组织由于密度小,通常漂浮于液面,使样品难以被充分研磨。若研磨不充分,会导致样品离心后不能得到明确清晰的分层,多数老师都会选择牺牲提取量以保证提取效果。深圳大学医学院的老师们正是遇到了上述的难题。通过咨询了解,老师们选择了和上海净信合作,采用上海净信研磨仪对乳腺癌组织进行研磨探究。实验步骤步骤 1:研磨前,将乳腺癌组织切取适量置于 2 ML EP 管,加入裂解液和研磨珠。
步骤 2:设置上海净信高通量组织研磨仪 70 HZ、3 min,完成组织的研磨。可见组织液上浮的脂肪组织呈细腻絮状,无肉眼可见的颗粒或小块。
步骤 3:后续再进行离心,将上清吸出,继续后续的 RNA 提取步骤。
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RNA抽提后出现奇怪情况
按步骤用50mg的小鼠肝脏提取总RNA,用预冷的研钵和-70度保存的trizol共研磨组织,氯仿分层,异丙醇沉淀,75%乙醇洗一遍,风干后depc水溶解沉淀,1.5%的琼脂糖电泳220V,20min,结果图如下,各位大神能帮我看看是什么情况吗?
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siRNA转染后目的蛋白没有减低是为什么?
我想用siRNA抑制DMT1,在吉马公司买了三个siRNA,我用的是lipo2000转染,转染前饥饿2h,转染6小时,后换成完全培养基48小时,对照使用转染GAPDH做的,接下来WB检测DMT1,却没有观察到目的蛋白的下降,请问有人遇到过相似的情况吗?应该怎么解决。
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最后溶解样品用DEOC水的量
师兄师姐好,我第一次做提取RNA的实验,不知道最后用DEPC水溶解样品时,用多少的DEPC水呢?
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