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【求助】如何有目的地突变镰刀菌等真菌内的某个基因?

关键词: 突变基因 2015-09-11 09:53 来源:丁香园论坛 点击次数:681

想有目的地突变镰刀菌内的某个基因,有没有什么良策啊?包括合适的载体等等,急,不胜感激。

也可以发我邮箱gggchilly @ yahoo.com.cn
你要看看是什么菌种,然后在google上搜索该菌的isogenic mutation, vector,plasmid等关键词。

一般地,如果该菌是可转化的话,应该是有发表的方法的。做法是把抗性基因(如Ampicillin)插入到你的目的基因内,然后转化某穿梭载体(能同时在E.coli和镰刀菌中扩增的),然后进行等位替换。

现在很多基因库都有大型的突变体库,供研究者索取。如果在镰刀菌中有人做过的话,应该有你要的基因(如果不是essential基因的话)。当然如果是essential基因你用上面的方法也拿不到突变体。

这些突变体库你可以找找比如yale university,日本一个叫national genetic biosource 还是什么的,washington university 有个中心(忘了名字了),ATCC等地方。

Good luck
非常感谢!!!!!!

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