定点诱变(DpnI法)
定点诱变(DpnI法):每条引物都要携带有所需的突变位点,引物一般长25~45bp,设计的突变位点需位于引物中部。
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载体多克隆位点(MCS)改造
加、减、换一个载体的MCS的位点(给一个表达载体加、减、换小表达标签,如His6, His10,strep II等,和MCS改造是一样的),其实技术不是问题,问题在于位点的选择,因为载体设计时应该设计者也考虑过mcs的问题,应该给使用者越多的选择越好,但为什么有的载体只给有限的几个位点呢,一可能是这个载体其他部位本身含有的限制性切点比较多,因而MCS位置的选择比较少,二就是设计者是自用的载体,没有 ...
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定点突变技术――从单点突变到多点突变
体外定点突变技术是研究蛋白质结构和功能之间的复杂关系的有力工具,也是我们在实验室中改造/优化基因常用的手段。蛋白质的结构决定其功能,二者之间的关系是蛋白质组 研究的重点之一。对某个已知基因的特定碱基进行定点改变、缺失或者插入,可以改变对应的氨基酸序列和蛋白质结构,对突变基因的表达产物进行研究有助于我们了解蛋白质结构和功能的关系,探讨蛋白质的结构/结构域。而利用定点突变技术改造基因,相信大家也非常熟 ...
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基因敲除小鼠
从基础研究到新治疗开发等诸多领域,科学家通过培育各种“基因敲除小鼠”,得以对特定基因进行研究,建立了人类疾病的动物模型。
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