琼脂糖凝胶电泳片断回收的常用方法
琼脂糖凝胶电泳片断回收的常用方法20世纪70年代是一个奠定现代分子生物学的时代,1973年冷泉港实验室的Joseph Sambrook和Phillip Sharp发明了利用琼脂糖凝胶分离DNA 和EB染料观测DNA 相结合的技术。现在,琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离、鉴定和纯化核酸和蛋白质片断的标准方法。这里首先介绍的是琼脂糖凝胶电泳片断回收的常用方法:1.柱回收试剂盒:可谓目前最简单快速的回收方法,只需要将电泳凝胶中 ...
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【原创】6种核酸提取方法附引用文献:动植物RNA(总、m),DNA,质粒
1、植物总RNA的提取以白菜花药组织为试材, 利用改良Tris-硼酸法提取花药总RNA。提取花药RNA的产量高、质量好、纯度高, 适用于mRNA差异显示及基因表达的Northern印迹等的RNA提取。分别采取蕾期和盛花期的花蕾和花朵, 迅速将花药剥离, 分装称重后液氮中速冻, - 80℃保存。1 RNase的灭活 所有用于RNA提取的玻璃器皿均在180℃条件下烘2h以上, 塑料管和枪头用 0. 1%焦碳酸二乙酯(DEPC)溶液在 37℃条件下处理24h后高压灭菌。2 . ...
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提取干血斑中的DNA样本
DNA提取需在II级生物安全柜内完成1.用打孔器将6mm直径大小的DBS打入1.5ml的离心管中,用烧灼和酒精搽拭的方法消毒打孔器头部。2.每个离心管中加入1ml去离子水,涡旋10秒,在管壁外侧做离心方向标记;3.将离心管置于摇床上,转速500-600转/分,室温,摇动15分钟;4.室温下,离心管12500×g,离心3分钟;5.小心从离心管中吸去上清约950μl去离子水,留50&m ...
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Qiagen公司的琼脂糖凝胶回收试剂盒使用心得
MinElute Gel Extraction Kit 品牌:Qiagen回收范围:70bp-4kb价格:(50包装1485,约29元/反应)特点:洗涤体积只要10ul,回收产物浓度高,方便后继实验 使用方便快捷(wash-and-spin) 高回收率 回收产物纯度高,可用于同位素或荧光测序、芯片分析、连接转化、酶切、标记、PCR、显微注射、体外转录等后继实验使用心得: 如果要回收片断量本来 ...
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