标签: 碱性磷酸酶 抗体 戊二醛 结合 酶学实验手册第三章
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实验所需「试剂」具体见「其他」
透析 25 mg 碱性磷酸酶和 10 mg lgG,分别在 PBS 中 4℃ 过夜,中途换液。在透析后的蛋白质溶液中加入戊二醛,最终浓度达到 2%(体积分数),4℃ 缓慢搅拌 2 h。用 PBS 透析 6 h,最后用 0.5 mol/L Tris-HCl pH 8.0 透析,4℃ 过夜。储存时在溶液中加入 1% BSA。
试剂:
戊二醛(Mr=100.1;50% 水溶液,商品化)
碱性磷酸酶(来自牛小肠黏膜,10 mg/ml)
0.5 mol/L Tris-HCl,pH 8.0
IgG 溶液(10 mg/ml 溶于缓冲液中,PBS 或 0.5 mol/L Tris-HCl,pH 8.0)PBS(磷酸缓冲液:10 m mol/L pH 7.2 磷酸二氢钾-钠,0.8% NaCl,0.02% KCl)
牛血清蛋白
透析管(Visking)
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