播种后三天,当胚芽鞘长约25-35毫米时,精选芽鞘长度一致的幼苗50株,用镊子从基部取下芽鞘,用切害虫器在带方格的玻璃板上切下离芽鞘顶端3毫米,长度为5-6毫米的切段(见图8)50段,立即放入含有2%蔗糖的磷酸缓冲液中(0.01 M ,pH4.5),浸泡1-2小时,以洗去内源生长素。
洗净并烘干五套培养皿,编号,在各培养皿中加入9 ml 含有2%蔗糖的磷酸缓冲液。然后在①中加入10-3 M 的吲哚乙酸缓冲液1 ml ,摇匀,即成含吲哚乙酸10-4 M 的缓冲液;然后从①中吸出1 ml 注入②中,摇匀,即成10-5 M 的溶液,如此继续到④号皿,配成10-7 M 的溶液,并吸出1 ml 弃去。⑤中不加吲哚乙酸作为对照。