靶向c-MET的嵌合抗原受体巨噬细胞(CAR-M-c-MET)抑制胰腺癌进展并提高细胞毒性化疗疗效

背景：胰腺导管腺癌(PDAC)是最恶性的肿瘤之一。巨噬细胞在肿瘤微环境中含量丰富，使其成为治疗干预的有吸引力的靶点。虽然目前的免疫疗法，包括免疫检查点抑制剂(ICI)和嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)，在胰腺癌中显示出有限的疗效，但一种涉及嵌合抗原受体巨噬细胞(CAR-M)的新方法，尽管有前景，尚未在胰腺癌中进行探索。在本研究中，我们首次研究了靶向c-MET的CAR-M细胞在胰腺癌中的作用。方法：通过生物信息学分析和胰腺癌患者样本的免疫组织化学染色，验证了c-MET作为CAR-M靶点的有效性和合理性。我们利用流式细胞术和生物发光检测方法，证明了CAR-M对胰腺癌细胞的特异性结合和吞噬杀伤作用。此外，我们使用共聚焦显微镜和长期荧光活细胞成像系统观察了CAR-M吞噬胰腺癌细胞的过程。在移植到NOD/SCID小鼠的原位肿瘤模型中，我们腹腔注射CAR-M以确认其对胰腺癌的抑制功能。此外，我们在人单核细胞来源的巨噬细胞(hMDM)中验证了这些发现。结果：生物信息学和肿瘤组织微阵列分析显示，与配对的癌旁组织相比，肿瘤组织中c-MET的表达水平显著更高，并且c-MET表达越高，患者生存期越差。使用人单核细胞THP-1细胞系和hMDM构建了靶向c-MET的CAR-M细胞(CAR-M-c-MET)。CAR-M-c-MET细胞对胰腺癌细胞表现出高度特异性结合，并比促炎极化的对照巨噬细胞表现出更强的吞噬和杀伤能力。此外，CAR-M-c-MET细胞与多种细胞毒性化疗药物具有协同作用。在NOD/SCID小鼠模型中，腹腔注射的CAR-M-c-MET细胞迅速迁移至肿瘤组织并显著抑制肿瘤生长，且未引起明显的副作用。细胞因子阵列和mRNA测序显示，CAR-M-c-MET产生的免疫激活剂水平高于对照巨噬细胞。结论：本研究为CAR-M疗法治疗胰腺癌的安全性和有效性提供了令人信服的证据。结果表明，CAR-M-c-MET显著抑制胰腺癌进展并增强细胞毒性化疗的效果。值得注意的是，没有观察到明显的副作用。需要进一步在人类胰腺癌患者中进行临床试验。