表达B7H3靶向BiTE的工程化溶瘤病毒增强抗肿瘤T细胞免疫应答

背景：双特异性T细胞衔接器（BiTE）是旨在刺激多克隆T细胞免疫的重组双特异性蛋白。近年来，泛癌抗原B7H3被认为是未来免疫治疗的有前景靶点。然而，针对B7H3的BiTE面临全身毒性的挑战。溶瘤病毒（OVs）代表了一类新的癌症免疫治疗药物，并可作为治疗基因局部递送的合适平台。在本研究中，我们设计了一种编码靶向人B7H3的BiTE的溶瘤腺病毒（OAd）。我们假设编码B7H3 BiTE的OVs将该分子持续递送至肿瘤部位，同时介导多克隆T细胞活化并将其重定向至肿瘤细胞。方法：通过将识别人B7H3的单链可变区片段（scFv）与识别人CD3的scFv连接，构建了靶向B7H3的BiTE。将B7H3 BiTE插入OAd中构建OAd-B7H3-BiTE。通过共培养B7H3+靶细胞和外周血单个核细胞检测OV递送的B7H3 BiTE的功能。使用人源化免疫系统小鼠模型评估体内治疗效果。结果：B7H3在大多数人类恶性肿瘤中高表达。OV递送的BiTE可与T细胞和靶细胞结合。我们观察到一系列反映OAd-B7H3-BiTE诱导的T细胞活化的现象，包括细胞聚集、细胞大小、活化标志物、细胞因子分泌和增殖。此外，T细胞活化与针对B7H3+肿瘤细胞的相应细胞毒性相对应。在体内，B7H3 BiTE在肿瘤中持续表达并增强抗肿瘤T细胞免疫应答。结论：使用OV局部表达B7H3 BiTE可以最大化BiTE的局部浓度，同时减少全身暴露。OV还为BiTE的功能提供了相对“热”的T细胞免疫环境。由于其能够激活多克隆T细胞，BiTE有潜力将病毒特异性T细胞重定向至肿瘤。我们的研究为开发B7H3-BiTE武装的OVs作为治疗B7H3阳性恶性肿瘤的治疗药物提供了新的机会。