表达靶向B7H3双特异性T细胞衔接器的工程化溶瘤病毒可增强抗肿瘤T细胞免疫反应

背景：双特异性T细胞衔接器（BiTEs）是一种旨在刺激多克隆T细胞免疫的重组双特异性蛋白。近年来，B7H3作为一种泛癌抗原，被认为是未来免疫治疗的有前景靶点。然而，靶向B7H3的BiTE面临系统性毒性的挑战。溶瘤病毒（OVs）代表了一类新型癌症免疫治疗药物，并可作为治疗基因局部递送的合适平台。本研究设计了一种编码靶向人B7H3的BiTE的溶瘤腺病毒（OAd）。我们假设编码B7H3 BiTE的OVs能将此分子持续递送至肿瘤部位，同时介导多克隆T细胞活化并将其重定向至肿瘤细胞。方法：通过将识别人B7H3的单链可变片段（scFv）与识别人CD3的scFv连接，构建了靶向B7H3的BiTE。将B7H3 BiTE插入OAd中构建OAd-B7H3-BiTE。通过共培养B7H3阳性靶细胞与外周血单个核细胞检测OV递送的B7H3 BiTE功能。采用人源化免疫系统小鼠模型评估体内治疗效果。结果：B7H3在大部分人类恶性肿瘤中高表达。OV递送的BiTEs可与T细胞及靶细胞结合。我们观察到一系列反映OAd-B7H3-BiTE诱导T细胞活化的现象，包括细胞聚集、细胞体积变化、活化标志物表达、细胞因子分泌及增殖。此外，T细胞活化还体现在对B7H3阳性肿瘤细胞的相应细胞毒性作用。在体内，B7H3 BiTE在肿瘤中持续表达并增强了抗肿瘤T细胞免疫应答。结论：利用OV局部表达B7H3 BiTE可最大化BiTE的局部浓度，同时减少全身暴露。OV还为BiTE功能提供了相对“热”的T细胞免疫环境。由于BiTE具有激活多克隆T细胞的能力，其可能将病毒特异性T细胞重定向至肿瘤。本研究为开发B7H3-BiTE武装的OVs作为治疗B7H3阳性恶性肿瘤的治疗剂提供了新机遇。