ADAM17功能阻断抗体通过CD16A、CD137和辅助细胞增强IL-15介导的NK细胞活化和增殖

背景：自然杀伤（NK）细胞作为癌症细胞疗法被广泛研究。这些细胞通过识别肿瘤细胞上的配体和抗原而被激活。细胞因子疗法，如IL-15，也广泛用于刺激癌症患者的内源性NK细胞和过继转移的NK细胞。这些刺激激活膜蛋白酶ADAM17，该酶切割NK细胞上的多种细胞表面受体，作为限制其细胞溶解功能的负反馈环。ADAM17抑制可增强IL-15介导的NK细胞体外和体内增殖。在本研究中，我们调查了这一过程的潜在机制。方法：来自人类外周血的PBMC或富集的NK细胞，未标记或标记细胞增殖染料，在有或无ADAM17功能阻断抗体的情况下，与rhIL-15共培养长达7天。生成了不同全人源版本的抗体；Medi-1（IgG1）、Medi-4（IgG4）、Medi-PGLALA、Medi-F(ab')2和TAB16（抗ADAM17和抗CD16双特异性抗体）以调节CD16A结合。使用流式细胞术评估NK细胞增殖和表型标志物，免疫印迹检查CD16A信号传导，IncuCyte活细胞成像测量NK细胞抗肿瘤活性。结果：ADAM17功能阻断单克隆抗体（mAb）Medi-1显著增加了IL-15诱导的NK细胞早期活化。通过使用不同工程化版本的抗体，我们证明了CD16A（一种激活型Fcγ受体和众所周知的ADAM17底物）的参与。因此，当Medi-1与NK细胞上的ADAM17结合时，被CD16A结合并阻断其脱落，诱导并延长其信号传导。这一过程未促进明显的NK细胞 fratricide 或功能障碍。Medi-1和IL-15的协同信号增强了CD16A+ NK细胞上CD137的上调，并在PBMC辅助细胞或抗CD137激动性单克隆抗体存在时增强了它们的增殖。结论：我们的数据首次揭示，CD16A和CD137分别支撑了Medi-1增强IL-15驱动的NK细胞活化和增殖，其中后者需要PBMC辅助细胞。使用Medi-1代表了一种增强IL-15驱动的NK细胞增殖的新策略，并可能通过增加癌症患者NK细胞的抗肿瘤活性具有治疗重要性。