cFLIP在实验性青光眼星形胶质细胞驱动的神经炎症分子调控中的作用

背景：近期实验性青光眼神经炎症研究指出cFLIP是细胞命运决定的分子开关，主要调控caspase-8在细胞死亡和炎症中的细胞类型特异性功能。本研究旨在通过分析星形胶质细胞靶向条件性敲除cFLIP或cFLIPL的结果，确定cFLIP在实验性青光眼星形胶质细胞驱动的神经炎症调控中的重要性。方法：通过前房微珠注射诱导眼压升高，在有无星形胶质细胞cFLIP或cFLIPL条件性敲除的小鼠品系中模拟青光眼。星形胶质细胞反应的形态学分析评估了GFAP和炎症分子免疫标记的视网膜铺片中的定量参数，或TUNEL检测。分子分析包括视网膜和视神经细胞因子和趋化因子的36重免疫分析、NanoString-based炎症相关基因表达谱分析，以及新鲜分离的星形胶质细胞样本中选定蛋白的Western blot分析。结果：视网膜和视神经组织的免疫分析和免疫标记显示，与对照组相比，在12周眼压升高时，GFAP/cFLIP和GFAP/cFLIPL中包括TNFα在内的多种促炎细胞因子产生减少，TUNEL无显著变化。除了呈现与免疫分析显示的促炎与抗炎分子相似趋势外，NanoString-based分子谱分析检测到眼高压样本的GFAP/cFLIP星形胶质细胞中NF-κB/RelA下调，RelB表达上调，而眼高压对照组无此变化。蛋白表达分析还显示，磷酸化RelA减少，磷酸化RelB增加，同时caspase-8裂解产物增加。结论：在眼高压眼中，星形胶质细胞cFLIP缺失引起显著的神经炎症限制反应，凸显了cFLIP在青光眼神经变性过程中胶质细胞驱动的神经炎症分子调控中的作用。伴随神经退行性炎症减轻的分子反应似乎也在cFLIP缺失时维持星形胶质细胞存活，尽管caspase-8裂解增加。一种转录自调控反应，抑制RelA但增强RelB以选择性表达NF-κB靶基因，可能增强cFLIP缺失星形胶质细胞的存活。