散在隐窝肠上皮细胞凋亡通过复杂机制诱导坏死性小肠结肠炎

背景与目的：坏死性小肠结肠炎（NEC）是一种危及生命的疾病，主要影响早产儿的回肠。肠上皮细胞（IEC）凋亡促进NEC的发病机制。然而，散在的隐窝IEC凋亡如何导致伴有过度绒毛上皮坏死的NEC仍不清楚。方法：开发了一种新型三重转基因小鼠模型，即3xTg-iAPcIEC（隐窝IEC中可诱导的凋亡表型），使用多西环素（Dox）诱导的tetO-rtTA系统和villin-cre技术诱导IEC特异性过表达Fasl转基因。3日龄新生3xTg-iAPcIEC小鼠及其同窝对照通过皮下（s.c.）给予单剂量Dox。在不同时间点处理肠道组织以检查散在隐窝IEC凋亡介导的NEC发展。使用基因敲除技术、抗体介导的细胞耗竭和抗生素促进的革兰氏阳性菌耗竭来研究机制。结果：用Dox处理3xTg-iAPcIEC小鼠幼崽诱导散在隐窝IEC凋亡，随后出现隐窝炎症和过度的绒毛坏死，类似于NEC。这一进展与回肠中Ifng、Rip3、CD8+ T细胞和革兰氏阳性菌升高相关。机制上，IFN-γ和RIP3激活的信号介导散在隐窝IEC凋亡对肠道隐窝炎症和绒毛坏死诱导的作用。同时，CD8+ T细胞浸润和革兰氏阳性菌失调的病理生理事件主要导致过度的绒毛炎症和坏死。值得注意的是，阻断这些事件中的任何一个都可以防止3xTg-iAPcIEC小鼠幼崽的NEC发展，强调了它们在NEC发病机制中的核心作用。结论：散在隐窝IEC凋亡通过IFN-γ、RIP3、CD8+ T细胞和革兰氏阳性菌介导的综合病理生理事件诱导小鼠幼崽的NEC。我们的发现可能增进对NEC预防和治疗的认识。关键词：凋亡、肠道炎症、坏死性小肠结肠炎