培养条件下从隐性营养不良型大疱性表皮松解症慢性伤口敷料分离的成纤维细胞维持其慢性特征

背景：隐性营养不良性大疱性表皮松解症（RDEB）是一种罕见的遗传性皮肤病，由编码Ⅶ型胶原（C7）的COL7A1基因变异引起。C7是表皮基底膜锚定纤维的重要组成部分。RDEB患者从水疱形成开始出现皮肤脆性，逐渐发展为慢性伤口、炎症和皮肤纤维化，且具有发展为侵袭性皮肤癌的高风险。由于缺乏RDEB患者伤口愈合缺陷的体外模型，现有的治疗选择受到限制。结果：为探索更高效、非侵入性的RDEB体外研究模型，我们获取了来源于废弃敷料的患者成纤维细胞，并比较了其与RDEB未损伤皮肤及健康供者皮肤活检来源成纤维细胞的表型特征。结果显示，与RDEB急性伤口、未受累RDEB皮肤及健康供者皮肤来源的成纤维细胞相比，RDEB慢性伤口（RDEB-CW）来源的成纤维细胞表现出衰老细胞特征、肌成纤维细胞分化增强以及TGF-β1信号通路成分水平升高。此外，与RDEB及对照组成纤维细胞相比，RDEB-CW成纤维细胞呈现更强的炎症因子（IL-1β和IL-6）分泌模式。值得注意的是，这些异常特征仅存在于RDEB-CW成纤维细胞中，且与培养方法无关，因为急性伤口敷料来源的成纤维细胞表现出更接近RDEB正常皮肤活检来源的表型。结论：我们的研究表明，体外培养的RDEB-CW成纤维细胞保持了独特的细胞和分子特征，类似于在RDEB患者慢性伤口中观察到的炎症和纤维化微环境。本研究描述了一种新型、非侵入性且无痛的策略，可用于获取长期处于炎症和纤维化环境中的人源成纤维细胞，支持其作为研究RDEB伤口愈合发病机制的易获取体外模型。因此，该方法非常适合在受控实验室条件下测试新的治疗策略。