Siglec-9是体外人类肥大细胞上的抑制性受体

背景：肥大细胞活化对于过敏性疾病的发展至关重要。唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素（Siglecs）如CD33、Siglec-6、-7和-8的结合已被证明可抑制肥大细胞活化。近期研究表明，人类肥大细胞表达Siglec-9，这是一种抑制性受体，也在中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞和树突状细胞上表达。目的：我们旨在体外表征人类肥大细胞中Siglec-9的表达和功能。方法：我们通过qPCR、流式细胞术和共聚焦显微镜评估了人类肥大细胞系和人类原代肥大细胞上Siglec-9和Siglec-9配体的表达。我们使用成簇规律间隔短回文重复序列（CRISPR）/CRISPR相关蛋白9（Cas9）基因编辑方法破坏SIGLEC9基因。我们通过使用天然Siglec-9配体、血型糖蛋白A（GlycA）和高分子量透明质酸（HMW-HA）、针对Siglec-9的单克隆抗体以及Siglec-9与高亲和力IgE受体（FcεRI）的共结合，评估了Siglec-9对肥大细胞功能的抑制活性。结果：人类肥大细胞表达Siglec-9和Siglec-9配体。SIGLEC9基因破坏导致基线时激活标志物表达增加，并且对IgE依赖性和IgE非依赖性刺激的反应性增强。用GlycA或HMW-HA预处理后再进行IgE依赖性或非依赖性刺激，对肥大细胞脱颗粒具有抑制作用。人类肥大细胞中Siglec-9与FcεRI的共结合导致脱颗粒、花生四烯酸产生和趋化因子释放减少。结论：我们的研究表明，Siglec-9及其配体在体外限制人类肥大细胞活化中发挥重要作用。临床意义：靶向Siglec-9可能通过抑制肥大细胞释放促炎介质的能力来限制肥大细胞对过敏性疾病的贡献。关键词：肥大细胞，Siglec-9，唾液酸，CRISPR/Cas9，FcεRI。胶囊摘要：人类肥大细胞功能性Siglec-9的表达在体外限制肥大细胞活化和介质释放。