单个甲型流感病毒在病毒-细胞界面诱导纳米级细胞重编程

在感染过程中，单个病毒粒子在病毒-细胞界面（质膜上与病毒直接接触的纳米级区域）触发特定的细胞信号传导。然而，病毒诱导的受体招募和细胞激活是在纳米尺度上几分钟内发生的瞬态过程。因此，由于技术限制，这些早期事件的时间和空间动力学往往仍知之甚少。为应对这一挑战，我们开发了一种方案，将标记的甲型流感病毒共价固定在玻璃表面，然后将其暴露于活的上皮细胞。我们的方法延长了病毒-质膜结合的观察时间，同时最小化了病毒修饰，便于对病毒-细胞相互作用进行活细胞成像。利用单分子超分辨率显微镜，我们研究了病毒-受体相互作用，显示病毒受体在病毒结合位点的移动性降低，导致特定的局部受体积累和周转。我们进一步在单病毒水平追踪网格蛋白介导的内吞作用的动力学，并证明衔接蛋白2（AP-2）的招募，此前认为AP-2不参与甲型流感病毒感染。最后，我们检查了病毒结合位点肌动蛋白细胞骨架的纳米级组织，显示细胞肌动蛋白皮层对感染病毒的局部和动态响应。