巨噬细胞特异性RhoA基因敲除延缓小鼠周围神经损伤后的华勒氏变性

背景：在华勒氏变性过程中，大量巨噬细胞被招募至受损神经，在免疫反应和吞噬变性轴突及髓鞘碎片中发挥关键作用，从而为神经再生创造有利的微环境。近年来，靶向RhoA通路的药物已被广泛用于促进周围神经轴突再生。然而，RhoA在巨噬细胞中对周围神经损伤后华勒氏变性和神经再生的作用仍不清楚。在此，我们提出假设：RhoA可能通过影响周围神经损伤后巨噬细胞的迁移和吞噬作用来影响华勒氏变性和神经再生。方法：采用免疫组织化学、Western blotting、H&E染色和电生理学方法评估坐骨神经横切和挤压损伤后LyzCre+/−; RhoAflox/flox (cKO)小鼠或Lyz2Cre+/− (Cre)小鼠（不分性别）的华勒氏变性和轴突再生。在受损神经和培养的巨噬细胞中检测巨噬细胞的迁移和吞噬功能。此外，还评估了ROCK和MLCK在培养巨噬细胞中的表达和潜在作用。结果：1. cKO小鼠巨噬细胞中的RhoA被特异性敲除；2. 与Cre小鼠相比，cKO小鼠受损神经中轴突和髓鞘的分解、轴突再生和神经传导均显著受阻，而肌萎缩更为严重；3. RhoA敲除在体内和体外均减弱了巨噬细胞的迁移和吞噬能力；4. cKO巨噬细胞中ROCK和MLCK表达下调，而抑制ROCK和MLCK可减弱巨噬细胞的迁移和吞噬能力。结论：我们的研究结果表明，巨噬细胞中RhoA的缺失对华勒氏变性和神经再生产生不利影响，这很可能是由于RhoA/ROCK/MLCK通路中断导致巨噬细胞迁移和吞噬功能受损所致。由于既往研究已证明神经元中RhoA抑制有利于轴突再生，本研究提醒我们在未来治疗周围神经损伤的应用中需要考虑RhoA靶向药物的细胞特异性。关键词：RhoA，巨噬细胞，华勒氏变性，神经再生，周围神经损伤