鞘内注射克拉生坦对蛛网膜下腔出血小鼠的神经保护作用及增强的血红蛋白清除

背景：克拉生坦是一种选择性内皮素受体A亚型拮抗剂，静脉给药已被用作抗血管痉挛药物。本研究旨在探讨鞘内注射克拉生坦是否能预防神经炎症并影响急性蛛网膜下腔出血（SAH）小鼠模型中对血红蛋白的淋巴清除。方法：雄性C57BL/6小鼠（n=109）接受视交叉前池注射SAH模型或假手术模型。从建模后30分钟起，小鼠随机接受持续脑室内输注生理盐水或克拉生坦（1、0.2和0.04 μg溶于192 μL生理盐水；分别定义为临床可达到血药浓度的50%、10%和2%），速率为8 μL/h，持续24小时。在建模后24和48小时通过神经行为测试、SAH分级和免疫组化染色评估干预效果，建模后24小时进行蛋白质印迹。结果：克拉生坦治疗不影响SAH分级，但在SAH小鼠中显示出剂量依赖性的生存改善趋势。比较生理盐水治疗和50%克拉生坦治疗显示，克拉生坦显著抑制SAH后神经功能恶化、血红蛋白浸润入脑以及脑内离子钙结合衔接分子1和腱生蛋白-C的诱导，并显著上调脑内血管内皮生长因子受体-3而不影响血管内皮生长因子-C水平。当比较不同克拉生坦剂量时，观察到高达10%克拉生坦对神经炎症的抑制作用。在建模后48小时，克拉生坦给药剂量依赖性地抑制神经功能恶化、血红蛋白浸润入脑以及血管周围巨噬细胞和小胶质细胞的激活，并增加SAH小鼠深颈部淋巴结中的血红蛋白沉积，而无颅内淋巴管增殖。结论：本研究首次表明，在临床可达到血药浓度十分之一的脑脊液浓度下，鞘内注射克拉生坦可通过抑制神经炎症抑制早期脑损伤，并与增强的血红蛋白淋巴引流相关。