NOX2诱导的氧化应激通过大鼠背根神经节神经元中PKCε的质膜转位参与神经病理性疼痛

背景：NADPH氧化酶2（NOX2）诱导的氧化应激，包括活性氧（ROS）和过氧化氢的产生，在神经病理性疼痛中起着关键作用。尽管蛋白激酶C（PKC）亚型在背根神经节（DRG）神经元中的激活和质膜转位已在多种疼痛模型中被证实，但NOX2诱导的氧化应激与PKC之间的相互作用仍不清楚。方法：在成年雄性大鼠中建立 spared nerve injury（SNI）模型。采用药理学干预和AAV-shRNA局部应用于DRG。通过Von Frey试验评估疼痛行为。采用Western blotting和免疫组化检测潜在机制。通过全细胞膜片钳记录DRG神经元的兴奋性。结果：SNI诱导DRG中NOX2持续上调长达2周，并增加DRG神经元的兴奋性，这些效应被局部应用gp91-tat（一种NOX2阻断肽）或NOX2-shRNA所抑制。值得注意的是，SNI诱导的PKCε（而非PKC）表达上调被gp91-tat降低。机械性异常性疼痛和DRG兴奋性被ψεRACK（一种PKCε激活剂）增强，被εV1-2（一种PKCε特异性抑制剂）降低。重要的是，εV1-2未能抑制SNI诱导的NOX2上调。此外，SNI诱导的DRG质膜和胞质中PKCε蛋白表达增加被gp91-tat预处理减弱，而增强的PKCε转位被H2O2处理再现。SNI诱导的PKCε上调被苯基-N-叔丁基硝酮（PBN，一种ROS清除剂）和过氧化氢酶（一种H2O2催化剂）减弱。此外，εV1-2减弱了H2O2诱导的机械性异常性疼痛。结论：NOX2诱导的氧化应激通过增加PKCε的质膜转位促进DRG的敏化和持续性疼痛。