辣椒素通过TRPV1-SSR4相互作用抑制小胶质细胞炎症

背景：瞬时受体电位香草酸亚型1（TRPV1）日益被认为是神经炎症期间小胶质细胞反应的重要调节因子，而神经炎症是阿尔茨海默病等多种神经退行性疾病的关键病理特征。辣椒素是辣椒中的主要辛辣成分，作为TRPV1激动剂发挥抗炎特性。尽管辣椒素激活TRPV1通道和信号转导的机制已被广泛研究，但TRPV1在神经退行性变背景下通过基于蛋白质-蛋白质相互作用的机制调节小胶质细胞炎症反应仍不清楚。方法：我们使用脂多糖诱导的急性神经炎症模型来检验TRPV1激活和药理学阻断TRPV1通道门控对小胶质细胞炎症反应的影响。使用基于邻近标记的蛋白质组学、生物发光共振能量转移和NanoLuc二元技术来鉴定和表征TRPV1相互作用蛋白。进行信号序列受体亚基4（SSR4）敲低和TRPV1与SSR4之间的强制相互作用以评估TRPV1–SSR4相互作用的功能贡献。进一步使用结构建模、基于BRET的结构域定位和共定位分析来检查TRPV1招募SSR4的分子和亚细胞特征。结果：在神经炎症模型中，TRPV1激动剂辣椒素以TRPV1依赖的方式减弱促炎细胞因子产生、神经元凋亡、小胶质细胞增生和小胶质细胞胞体增大。值得注意的是，capsazepine对TRPV1通道门控的药理学阻断并未消除辣椒素的抗炎作用，提示存在超越经典配体门控Ca2⁺内流的替代作用机制。对TRPV1猎物蛋白的筛选和验证策略鉴定出SSR4是一种辣椒素响应性、TRPV1相关蛋白。小胶质细胞中SSR4敲低显著减弱了TRPV1激活引起的炎症反应抑制。相反，TRPV1与SSR4之间的强制相互作用部分模拟了TRPV1激活的抗炎作用。进一步的结构和细胞分析提示TRPV1的跨膜区域支持SSR4招募。结论：我们的发现提示辣椒素通过TRPV1–SSR4相互作用抑制小胶质细胞炎症，为TRPV1内感受信号传导的化学生物学基础以及天然TRPV1激动剂在改善神经炎症相关神经退行性变治疗中的潜在应用提供了新见解。