运动通过下调小胶质细胞TMEM9促进脂自噬并减轻阿尔茨海默病认知障碍

背景：自噬-溶酶体功能障碍导致脂滴（LD）积累，从而驱动阿尔茨海默病（AD）的病理进展。据报道，运动可恢复AD中的自噬-溶酶体功能并减轻认知障碍，但其对LD沉积的调控尚不清楚。方法：5×FAD转基因小鼠接受为期三个月的运动干预。使用Morris水迷宫、新物体识别和旷场实验评估认知和情绪行为。通过油红O和BODIPY染色评估LD沉积。进行蛋白质组测序以鉴定受运动影响的蛋白质。通过免疫荧光、蛋白质印迹和透射电子显微镜检查病理变化。使用脑室内注射AAV来过表达或敲低小胶质细胞TMEM9，以研究体育锻炼影响AD行为 and 病理的机制。体外，培养BV2细胞并用寡聚β-淀粉样蛋白（oAβ）孵育，加或不加油酸以诱导LD形成。使用调节自噬-溶酶体功能的氯喹和雷帕霉素，在葡萄糖剥夺条件下检查LD对线粒体完整性的影响。使用慢病毒或质粒转染探索TMEM9在调节脂自噬中的关键作用，并通过免疫共沉淀检测TMEM9与ATP6AP1之间的相互作用。临床上，通过ELISA测量AD患者血浆TMEM9和ATP6AP1水平，并进行受试者工作特征（ROC）分析以评估诊断性能。结果：运动通过增强脂自噬减轻大脑LD沉积，保持线粒体完整性并减轻认知衰退。机制上，运动抑制小胶质细胞TMEM9表达，恢复LD降解。Tmem9下调促进LKB1溶酶体易位，激活AMPK信号。体外，油酸诱导的LD在葡萄糖剥夺和oAβ暴露下保持BV2小胶质细胞的线粒体膜电位并增加ATP产生。Tmem9过表达加剧脂自噬障碍和线粒体功能障碍，而Tmem9敲低增强脂自噬和细胞保护。Aβ清除受TMEM9负调控。临床上，AD患者表现出特征性Aβ沉积和葡萄糖低代谢，血浆TMEM9水平与p-tau217进展强烈相关。血浆TMEM9和TMEM9/ATP6AP1比值成为潜在的AD诊断生物标志物（AUC分别为0.791和0.853）。结论：这些发现确立运动诱导的TMEM9抑制作为一种靶向脂质稳态以对抗AD进展的新型治疗策略。