Avutometinib, Abemaciclib, and Fulvestrant in Patients with HR+/HER2- Metastatic Breast Cancer Previously Treated with CDK4/6 Inhibitor: A Single-Arm Phase I Trial
单臂I期剂量爬坡与RP2D确定，含安全性、PK、TKa药效学及ORR/CBR/PFS疗效评估，但无强制肿瘤活检
HR+/HER2-转移性乳腺癌患者（n=16） 可测量病灶患者（n=15）
患者人群：IV期HR+/HER2-浸润性乳腺癌，既往CDK4/6抑制剂治疗进展，允许既往fulvestrant，排除既往MEK抑制剂或因毒性停用abemaciclib者 剂量水平：abemaciclib 50/100/150 mg每日两次，avutometinib 2.4/3.2/4 mg每周两次（3周用药/1周停药），fulvestrant 500 mg每28天肌肉注射（C1D15负荷剂量） DLT评估窗口：治疗开始后前28天，DLT定义为≥3级临床显著症状或实验室不良事件，或任何需按方案减量的治疗相关毒性 疗效评估：每8周（24周后每12周）按RECIST v1.1进行影像学评估，确认缓解需至少两次间隔≥4周的连续扫描符合RECIST标准 TKa检测：DiviTum TKa assay（Biovica），LLOQ 50 DuA，低于LLOQ赋值为49 DuA，C2D1和C3D1采样处于avutometinib停药周
提炼研究问题、关键发现与证据，快速把握文章的核心贡献。
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
确定abemaciclib、avutometinib和fulvestrant联合方案的最大耐受剂量和II期推荐剂量。
采用BOIN设计，患者按3例一组入组，评估三个计划剂量水平的abemaciclib（50、100、150 mg每日两次）和三个计划剂量水平的avutometinib（2.4、3.2、4 mg每周两次，3周用药/1周停药），fulvestrant固定500 mg每28天肌肉注射。起始剂量水平为abemaciclib 150 mg每日两次和avutometinib 3.2 mg每周两次。根据DLT发生率指导剂量递增或递减。
评估联合方案的安全性和耐受性。
收集所有接受至少一剂研究药物的患者的不良事件，按CTCAE v5.0分级。记录TRAE发生率和严重程度，以及剂量中断、减量和停药情况。
评估联合方案的初步抗肿瘤活性。
在可测量病灶且接受至少一剂avutometinib和abemaciclib的患者中按RECIST v1.1评估ORR，确认缓解需至少两次间隔≥4周的连续扫描符合RECIST标准；CBR定义为CR、PR或SD持续≥24周的比例；PFS和OS采用Kaplan-Meier法估计。
表征avutometinib、abemaciclib及其活性代谢物M2和M20的浓度-时间曲线。
在C1D1、C1D15、C2D1和C3D1单次给药后采集全血样本，C1D1和C1D15在给药前及给药后0.5、1、2、4、6、8、24小时采样，C2和C3周期仅采集第1天给药前样本。采用非房室分析估计PK参数。
评估血清胸苷激酶活性（TKa）作为肿瘤增殖和治疗反应的药效学标志物。
使用DiviTum TKa assay（Biovica International AB）测量血清TKa，在基线、C2D1、C3D1和EOT采集系列血样。探索性分析评估基线和早期治疗中TKa水平与临床结局（客观缓解、临床获益和PFS）的关联。
描述性分析MAPK通路激活相关基因组改变。
回顾性收集CDK4/6抑制剂暴露后、试验入组前常规临床NGS报告（包括组织和液体活检），注释与MAPK通路激活一致的基因组改变（如KRAS、NRAS、BRAF、NF1、FGFR1突变/扩增）。
按研究目的归类文中使用的方法，便于定位所需技术。
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 药效学分析（TKa） | DiviTum TKa检测试剂盒 | Biovica International AB | K202852 |
| 抗BrdU单克隆抗体 | -- | -- | |
| 数据分析与统计 | 统计分析系统 | SAS | RRID:SCR_008567 |
| R统计计算项目 | R | RRID:SCR_001905 |
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 剂量爬坡与MTD/RP2D确定 | 剂量水平与起始剂量：abemaciclib 50/100/150 mg每日两次，avutometinib 2.4/3.2/4 mg每周两次（3周用药/1周停药），fulvestrant 500 mg每28天肌肉注射（C1D15负荷剂量）；起始剂量水平为abemaciclib 150 mg每日两次和avutometinib 3.2 mg每周两次；BOIN设计目标毒性率0.25，递增阈值≤0.197，减量阈值>0.298；DLT评估窗口为前28天；患者按3例一组入组，最大计划样本量30例 阅读提示：Methods中Study design and treatment和Statistical design and analysis小节；Supplementary Fig. S2；Table 1 |
| 患者入组与基线特征 | 入组标准：IV期HR+/HER2-浸润性乳腺癌，按ASCO/CAP指南定义，RECIST v1.1可评估或可测量病灶，既往CDK4/6抑制剂治疗进展（辅助治疗期间或完成辅助治疗后12个月内，或转移阶段），允许既往fulvestrant，允许既往其他SERD，男性和绝经前女性需接受每月GnRH激动剂治疗，年龄≥18岁，ECOG PS≤2；排除标准：既往MEK抑制剂治疗，因毒性停用abemaciclib，活动性脑转移或软脑膜疾病，横纹肌溶解或神经肌肉疾病史伴CPK升高，既往眼部病变 阅读提示：Methods中Patient population小节；Table 1 |
| 安全性评估 | 不良事件按CTCAE v5.0分级；不收集1级毒性；TRAE发生率、剂量中断、减量和停药情况；MTD队列（n=10）的3级TRAE发生率及具体事件类型 阅读提示：Methods中Statistical design and analysis小节；Results中Safety and tolerability小节；Table 2；Supplementary Table S2 |
| 疗效评估 | 可测量病灶患者n=15；确认缓解需至少两次间隔≥4周的连续扫描符合RECIST标准；CBR定义为CR、PR或SD持续≥24周；ORR和CBR分母为可测量病灶患者n=15；SD和PD计算分母n=16；影像学评估每8周（24周后每12周）；中位随访13.9个月 阅读提示：Methods中Statistical design and analysis小节；Results中Efficacy小节；Table 3；Figure 1 |
| 药代动力学分析 | 16例患者，16个时间点，252份样本；采样时间点C1D1、C1D15、C2D1、C3D1；C1D1和C1D15给药前及给药后0.5、1、2、4、6、8、24小时采样；C2和C3周期仅第1天给药前采样；非房室分析；PK参数包括Cmax、AUC0-tlast、AUC0-tau 阅读提示：Methods中PK analyses小节；Results中PK analyses小节；Figure 2；Supplementary Tables S5和S6 |
| 药效学分析（TKa） | DiviTum TKa assay（Biovica International AB），LLOQ为50 DuA，低于LLOQ赋值为49 DuA；采样时间点：基线（n=16）、C2D1（n=17）、C3D1（n=15）、EOT（n=6）；基线TKa分类阈值250 DuA；治疗中TKa探索性阈值100 DuA和50 DuA；C2D1和C3D1采样处于avutometinib停药周 阅读提示：Methods中Pharmacodynamic analyses (TKa)小节；Results中Pharmacodynamic analyses (TKa)小节；Figure 3；Supplementary Fig. S5 |
| 基因组分析 | 回顾性收集CDK4/6抑制剂暴露后、试验入组前常规临床NGS报告；包括组织和液体活检；注释与MAPK通路激活一致的基因组改变（KRAS、NRAS、BRAF、NF1、FGFR1突变/扩增）；探索性和描述性分析 阅读提示：Methods中Genomic analyses小节；Results中Patient characteristics小节；Table 1脚注d；Supplementary Tables S3和S4 |
