患者随机分组与MBT-T干预
评估MBT-T对乳腺癌患者炎症基因表达的影响。
将完成 primary treatments 的乳腺癌患者随机分为CTL组(标准随访)和MBT-T组(标准随访加双周MBT-T,为期4个月,共8次,每次90-120分钟),采集血样。
Transcriptomic signatures of mind-body transformations therapy in breast cancer: Downregulation of the interferon signaling pathway
随机对照试验,全血RNA的NanoString炎症基因 panel 分析,通路评分与ORA验证,但无体外或动物模型功能验证。
乳腺癌患者全血样本(CTL组 n=7,MBT-T组 n=14)
随机分组:CTL组接受标准随访,MBT-T组接受标准随访加双周MBT-T,为期4个月(8次) 血样采集时间点:治疗前(T0)、首次干预后1小时(T1)、2个月后(T2)、治疗结束(Tt) 基因表达分析:nCounter® Human Inflammation Panel(249个基因),比较T0与Tt 差异表达阈值:BH校正p<0.05,低表达基因(均值标准化计数<20)被排除 通路富集分析:ORA使用clusterProfiler,基因集来自MSigDB(Hallmark和Reactome),背景为panel基因(n=185),FDR<0.05
提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
评估MBT-T对乳腺癌患者炎症基因表达的影响。
将完成 primary treatments 的乳腺癌患者随机分为CTL组(标准随访)和MBT-T组(标准随访加双周MBT-T,为期4个月,共8次,每次90-120分钟),采集血样。
获取用于转录组分析的高质量RNA。
在T0、T1(首次干预后1小时)、T2(2个月后)和Tt(治疗结束)采集6-8 mL血样,从2 mL全血中使用QIAamp RNA Blood Mini Kit提取总RNA,并通过Nanodrop确保RNA完整性和纯度。
量化炎症相关基因表达,识别差异表达基因。
使用nCounter® Human Inflammation Panel(249个基因)对21名患者(CTL n=7,MBT-T n=14)的RNA进行表达谱分析,比较T0和Tt。
鉴定差异表达基因并确定受影响的生物学通路。
使用nSolver软件进行数据标准化和差异表达分析,计算log2FC和p值,使用Benjamini-Hochberg校正,然后使用R的clusterProfiler进行过表达分析(ORA),基因集来自MSigDB(Hallmark和Reactome)。
按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| RNA提取 | QIAamp RNA血液迷你试剂盒 | -- | 52304 |
| 基因表达分析 | nCounter®人类炎症Panel | NanoString Technologies | -- |
| 数据分析 | nSolver™分析软件 | -- | -- |
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 患者分组与干预 | 随机分组方法、MBT-T干预的具体内容(治疗性催眠、积极期望、集中注意力)、干预频率(双周,4个月,8次)、每次时长(90-120分钟) 阅读提示:Methods 2.1和2.2节 |
| 血样采集与RNA提取 | 采血时间点(T0、T1、T2、Tt)、血样体积(6-8 mL)、RNA提取试剂盒(QIAamp RNA Blood Mini Kit,Cat no./ID. 52304)、RNA质量控制方法(Nanodrop) 阅读提示:Methods 2.3节 |
| 基因表达谱分析 | nCounter® Human Inflammation Panel(249个基因)、样本量(CTL n=7,MBT-T n=14)、RNA质量排除标准(MBT-T组2例因质量不足排除) 阅读提示:Methods 2.4节和Fig. 1 |
| 数据标准化与差异表达分析 | 标准化方法(内部阳性对照和管家基因)、低表达过滤阈值(均值标准化计数<20)、差异表达统计模型(负二项线性模型或对数线性模型)、多重检验校正方法(Benjamini-Hochberg)、显著性阈值(BH校正p<0.05) 阅读提示:Methods 2.5和2.6节 |
| 通路富集分析 | ORA方法(clusterProfiler)、基因集来源(MSigDB Hallmark和Reactome)、背景基因(panel基因,n=185)、显著性阈值(FDR<0.05) 阅读提示:Methods 2.7节 |