参与者招募与成像准备
建立健康志愿者和全身性疾病患者的队列,并进行瞳孔扩张以进行AOSLO成像。
招募23名健康志愿者和3名全身性疾病患者,进行眼底照相、OCT-A和AOSLO成像。
Characterization of Leukocyte Crawling in the Living Human Retina Using Adaptive Optics Scanning Light Ophthalmoscopy
对23名健康志愿者和3名患者进行在体视网膜成像,手动追踪白细胞爬行事件,但缺乏功能或机制验证。
23名健康志愿者 3名全身性疾病患者(糖尿病、镰状细胞病、梅毒) 人视网膜微血管
健康志愿者年龄范围20-75岁,平均38.0±18.2岁,10男13女 每个ROI连续采集6秒AOSLO视频,持续5分钟,平均每个ROI约26次采集 共分析231个白细胞爬行事件(排除1个毛细血管事件) 根据血流方向将爬行模式分为顺行、逆行、折返和横穿 使用TrackMate手动追踪,通过Bennett-Littmann公式换算距离
提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
建立健康志愿者和全身性疾病患者的队列,并进行瞳孔扩张以进行AOSLO成像。
招募23名健康志愿者和3名全身性疾病患者,进行眼底照相、OCT-A和AOSLO成像。
获取视网膜微血管的高分辨率图像,以可视化白细胞。
使用商用AOSLO设备在颞侧视网膜的2-4个ROI采集连续6秒视频,持续5分钟。
对齐图像以追踪白细胞运动并生成用于分析的视频。
使用ImageJ插件对共焦、相差和灌注图像进行配准,生成5分钟延时相差视频。
手动识别和追踪白细胞爬行事件,并测量相关参数。
两名评分者重复审查5分钟延时视频,手动追踪爬行事件,测量速度、血管类型、爬行模式和管腔直径。
在全身性疾病患者中观察额外的白细胞动力学。
在糖尿病、镰状细胞病和梅毒患者中观察白细胞粘附、反向跨内皮迁移和血管外细胞运动。
按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 眼底照相 | DRI OCT Triton Plus | Topcon | -- |
| OCT-A扫描 | Avanti RTVue-XR | Optovue | -- |
| AOSLO成像 | MONA IV | Robotrak Technologies | -- |
| 图像处理 | MonaPro V1.00.04.251030 | Robotrak Technologies | -- |
| 眼轴测量 | IOL Master | Carl Zeiss Meditech | -- |
| 图像配准 | Register Virtual Stack Slices插件 | ImageJ | -- |
| 图像处理 | BioVoxxel工具箱 | -- | -- |
| 统计 | SPSS 24.0版 | IBM Corporation | -- |
| 瞳孔扩张 | 托吡卡胺0.5%至1% | -- | -- |
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 参与者与成像 | 健康志愿者年龄范围20-75岁,患者疾病类型;瞳孔扩张至至少5 mm;排除标准 阅读提示:Methods中的Participants小节 |
| AOSLO图像采集 | 成像参数:波长840 nm,功率640 µW,视场2.4°×2.4°,帧率约14 Hz,采集时间5分钟 阅读提示:Methods中的Fundus, OCT-A, AOSLO, and Axial Length Instruments小节 |
| 图像配准与视频生成 | 配准方法:使用ImageJ插件,基于共焦图像,必要时使用灌注图像 阅读提示:Methods中的Registering Confocal, Phase-Contrast, and Perfusion Images Across 5 Minutes小节 |
| 白细胞爬行追踪 | 手动追踪使用TrackMate插件;两名评分者;速度计算基于距离/时间 阅读提示:Methods中的Identifying and Tracking of Leukocyte Crawling Over 5 Minutes小节 |
| 管腔直径测量 | 使用ImageJ插件,基于相差图像,通过强度峰值识别血管壁 阅读提示:Methods中的Lumen Diameter Measurement小节 |