冷冻保存时长对胚胎妊娠结局影响的系统评价与Meta分析

研究问题：延长冷冻保存是否与冻融胚胎移植后不良的临床妊娠和活产相关？ 总结答案：延长胚胎冷冻保存与较低的临床妊娠率和活产率相关，尤其在保存的前3–12个月内，但2年后比率趋于稳定。 已知信息：关于冷冻保存时长对生殖结局影响的证据仍然稀少且相互矛盾，一些研究报告无不良影响，而另一些则提示延长保存后流产、早产和表观遗传改变的风险增加。 研究设计、规模、持续时间：对按冷冻保存时长比较妊娠结局的研究进行系统评价和Meta分析。检索PubMed、Embase和Cochrane Library从建库至2025年12月31日的英文文献。检索策略使用布尔运算符组合胚胎（如'Embryo'、'Blastocyst'）、冷冻保存技术（如'vitrification'、'cryopreservation'、'freezing'）和妊娠结局（如'pregnancy'、'live birth'）相关术语。共从PubMed识别5208条记录，Embase 9272条，Cochrane Library 331条。 参与者/材料、设置、方法：两名独立评价者筛选研究、提取数据并使用纽卡斯尔-渥太华量表评估质量。纳入要求报告按冷冻保存时长分层的临床妊娠率（CPR）或活产率（LBR）。排除关于捐赠胚胎、植入前遗传学检测或配子冷冻保存的研究。采用固定或随机效应模型（基于异质性I²）计算合并比值比（OR）及95%置信区间。对新生儿结局（单胎vs多胎）进行亚组分析。通过漏斗图评估发表偏倚。 主要结果和偶然性的作用：共筛选14811条记录（PubMed 5208条，Embase 9272条，Cochrane 331条）。去除重复后，按标题和摘要筛选11077条记录，评估785篇全文的合格性。纳入23项研究（254017个移植周期/患者）。冷冻保存>5年的胚胎存活率较低（OR = 0.84，95% CI：0.72–0.98，P = 0.03；I2 = 0%，P = 0.99）。与≤3个月保存相比，更长保存与CPR降低相关（>3个月：OR = 0.87，95% CI：0.78–0.96，P = 0.005；>6个月：OR = 0.70，95% CI：0.66–0.74，P < 0.00001；>12个月：OR = 0.71，95% CI：0.61–0.82，P < 0.00001；>2年：OR = 0.77，95% CI：0.65–0.91，P = 0.003），LBR降低（>3个月：OR = 0.90，95% CI：0.84–0.95，P = 0.0008；>6个月：OR = 0.74，95% CI：0.69–0.80，P < 0.00001；>12个月：OR = 0.72，95% CI：0.63–0.84，P < 0.0001；>2年：OR = 0.80，95% CI：0.72–0.89，P < 0.0001），生化妊娠率降低（>3个月：OR = 0.82，95% CI：0.73–0.92，P = 0.0007；>6个月：OR = 0.70，95% CI：0.63–0.77，P < 0.00001；>12个月：OR = 0.72，95% CI：0.65–0.80，P < 0.00001；>2年：OR = 0.74，95% CI：0.61–0.90，P = 0.002）。>12个月保存后流产率（OR = 1.16，95% CI：1.09–1.25，P < 0.0001）和早产率（OR = 1.10，95% CI：1.00–1.20，P = 0.04）较高。高出生体重和畸形率未显著增加，但>6个月（OR = 0.83，95% CI：0.70–0.99，P = 0.04）或>12个月（OR = 0.75，95% CI：0.57–0.98，P = 0.03）后低出生体重较少见，与≤3个月冷冻保存相比，>3个月（OR = 0.92，95% CI：0.86–0.98，P = 0.02）和>2年（OR = 0.79，95% CI：0.64–0.97，P = 0.02）后男性婴儿比例较低。未检测到显著发表偏倚。 局限性、谨慎原因：局限性包括研究间存在显著异质性（设计、冷冻保存方法、胚胎阶段、混杂因素调整），由于报告不一致无法评估冻融胚胎移植（FET）周期类型、母亲年龄和胚胎质量，回顾性观察设计无法进行因果推断，残余混杂，潜在幸存者偏倚，以及新生儿结局中单胎/多胎数据合并。尽管样本量大（254017个周期），这些因素仍需要谨慎解释。 研究发现的更广泛意义：这项全面Meta分析揭示了冷冻保存时长与结局之间的非线性关系，通过证明早期下降（前3–12个月）后在2年后趋于稳定，调和了先前相互矛盾的报道。超长保存中结局的稳定性对于需要延迟移植的患者是令人安心的。这些发现支持临床咨询，鼓励在可行时尽早移植，但提供安慰，即超长保存不会导致妊娠或新生儿结局的进行性恶化。 资助：本工作由广西医科大学一流学科创新驱动人才计划（资助J.L.）和广西医科大学大学生创新创业训练计划（X202410598348）资助。 披露：作者声明无利益冲突。 注册号：CRD42024555362。 关键词：胚胎、冷冻保存、时长、长期、妊娠。 这对患者意味着什么？当人们接受生育治疗时，任何剩余的胚胎都可以被冷冻（冷冻保存）以备将来使用。这是常见做法，但直到现在还不清楚长期保存胚胎是否影响成功妊娠的机会。在这项研究中，我们回顾了23篇涉及超过250000个胚胎移植周期的研究论文，以了解保存时间长度是否有影响。我们发现，冷冻超过5年的胚胎在解冻过程中存活的可能性略低。与保存3个月或更短的胚胎相比，保存超过3个月（尤其是超过6或12个月）的胚胎妊娠率和活产率较低。保存12个月后流产风险也较高。然而，保存2年后，结局不再恶化——即使保存时间更长，结局也保持不变。积极的一面是，较长保存并未增加早产、高出生体重或出生缺陷的风险。一个有趣的发现是，当胚胎保存超过3个月时，生男孩的几率略低。因此，如果可能，尽早使用冷冻胚胎（在最初几个月内）可能获得最佳的妊娠和活产机会。但如果需要更长时间保存，这项研究表明2年后风险不会继续增加。超长保存（超过2年）似乎不会造成进一步伤害。这些发现可以帮助医生和患者更明智地决定何时使用冷冻胚胎。