临床级iPSC-NS/PCs的制备与质量控制
获得符合预定质量标准、可用于移植的细胞产品
将GMP条件下建立的人iPSC系YZWJs513经SFEBq方案分化为NS/PCs，神经球培养扩增；终产物ONH-iPSNPC-003经形态、表型标志物、终末分化能力、纯度、染色体核型、基因组及微生物学等质量控制检测。
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iPSC来源的神经祖细胞治疗亚急性脊髓损伤：一项1期试验及长期随访
An iPSC-derived neural progenitor cell therapy for subacute spinal cord injury: a phase 1 trial with long-term follow-up
实验完整度
中首次人体1期临床试验，4例患者，含安全性、影像学、神经功能与免疫学验证，但缺乏直接移植物存活与机制验证
主要模型
4例亚急性颈段完全性脊髓损伤患者（AIS A级，NLI C4–C6） 临床级人iPSC系YZWJs513分化的神经干/祖细胞（ONH-iPSNPC-003） 历史对照队列：JSSCI-DB注册的52例AIS A级颈段脊髓损伤患者
重点核对
移植细胞剂量：2×10^6 iPSC-NS/PCs，单次髓内注射至损伤中心 免疫抑制方案：他克莫司，移植前1天开始，目标谷浓度5–10 ng/ml，维持6个月，9个月内逐渐减停 随访期：52周干预研究期，后续长期观察至移植后2–4年（患者1为4年，患者2为3年，患者3为2.5年，患者4为2年） 安全性评估：全因不良事件系统记录，MRI（3、12、24、52周及长期6个月间隔），18F-FDG PET（第24周） 疗效评估：ISNCSCI运动/感觉评分、SCIM III、PainDETECT、NPSI、MAS，评估时间点为第1、3、5、8周及此后每4周至52周
摘要
脊髓损伤（SCI）导致不可逆的运动和感觉缺损，目前尚无疗法能恢复受损的神经环路。既往研究表明，移植诱导多能干细胞（iPSC）来源的神经干/祖细胞（NS/PCs）在亚急性SCI的临床前模型中可恢复运动功能；然而，该方法在人体中的安全性仍属未知。本文报道了一项首次人体、开放标签研究的结果，对四名亚急性颈段完全性SCI患者进行了iPSC-NS/PC移植。主要安全性终点达成，在2–4年随访期间未观察到肿瘤形成或与移植物相关的不良事件，影像学显示移植物部位稳定。探索性疗效作为次要终点进行评估。从基线（损伤后2周）至第52周，国际脊髓损伤神经学分类标准运动评分中位改善为13分（范围10–40），其中两名患者的美国脊髓损伤协会损伤量表分级改善（A→C和A→D）。这些改善在数值上大于基于注册队列观察到的自发恢复。本研究提供了临床证据，表明在短期免疫抑制下将人iPSC-NS/PCs移植入受损脊髓是可行且安全的，研究结果支持进一步的临床评估。该试验注册于UMIN000035074、UMIN000050104和jRCTa031190228。
实验结论
提炼研究问题、关键发现与证据，快速把握文章的核心贡献。
- 研究问题
- 在亚急性完全性脊髓损伤患者中，移植人iPSC来源的神经干/祖细胞是否安全可行，并可能改善神经功能？
- 核心机制
- 文中未明确说明；临床研究无法直接证明移植物存活、分化或功能整合，机制证据来自临床前研究。
- 主要证据
- 4例患者均完成52周干预，未发生肿瘤形成或与移植物相关的不良事件；MRI及18F-FDG PET未见异常增殖；中位运动评分改善13分，2例AIS分级改善（A→C、A→D）；MLR显示患者1–3淋巴细胞激活极低。
- 研究意义
- 本研究提供了iPSC-NS/PC移植入人脊髓在短期免疫抑制下可行且安全的首次人体证据，支持后续对照试验以确定能否产生持久且临床有意义的功能结局。
研究路径
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
移植前细胞处理
恢复细胞活力并抑制Notch信号以降低致瘤风险
移植前4天解冻培养，移植前24小时加入γ-分泌酶抑制剂DAPT抑制Notch信号；移植前彻底去除培养上清，将细胞重悬于人工脑脊液。
髓内移植手术
将细胞递送至损伤中心
全身麻醉下俯卧位，手术暴露脊髓，术中超声确认损伤中心；用微注射器将2.0×10^6 iPSC-NS/PCs缓慢注射至损伤中心，注射时间≥60秒，留针3分钟后拔针。
围手术期免疫抑制
预防同种异体免疫排斥
移植前1天开始他克莫司静脉输注，目标谷浓度5–10 ng/ml；可口服后改为口服，维持6个月，随后逐渐减量，9个月内停用。
安全性与疗效评估
评估移植安全性及探索神经功能恢复
52周干预期内系统记录不良事件；MRI于3、12、24、52周进行，第24周行全身18F-FDG PET；神经功能采用ISNCSCI、SCIM III、PainDETECT、NPSI、MAS评估。长期观察期每6个月评估至3年，之后每年一次。
免疫学评估
评估供受体免疫兼容性
移植前进行HLA分型；采集患者外周血20 ml作为反应细胞，iPSC-NS/PCs作为刺激细胞，进行混合淋巴细胞反应（MLR）检测刺激指数。
历史队列比较
为神经功能恢复提供背景参考
从JSSCI-DB数据库筛选2013–2024年AIS A级、损伤水平C4–C8、排除严重并发症的患者，最终纳入52例，比较运动评分变化及AIS分级改善。
研究方法
按研究目的归类文中使用的方法，便于定位所需技术。
产品清单
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 细胞制备 | DAPT | -- | -- |
| 人工脑脊液 | -- | -- | |
| 免疫抑制 | 他克莫司 | -- | -- |
| MRI | Signa HDxt | GE Healthcare | -- |
| Signa Artist | GE Healthcare | -- | |
| Discovery MR750 | GE Healthcare | -- | |
| Signa Pioneer | GE Healthcare | -- | |
| PET | Biograph Vision 600 | Siemens Medical Solutions | -- |
| PET分析 | syngo.via | Siemens Healthineers | -- |
关键环节
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 细胞制备与移植 | 细胞产品ONH-iPSNPC-003的质量标准（表型标志物表达、终末分化能力、纯度、核型、基因组稳定性、微生物学检测）；移植剂量2×10^6；DAPT处理24小时；注射时间≥60秒，留针3分钟。 阅读提示：Extended Data Table 1、Extended Data Table 2、Extended Data Fig. 1、Methods中“Preparation of human iPSC-NS/PCs”和“Surgical procedure” |
| 免疫抑制方案 | 他克莫司起始时间（移植前1天）、给药途径（静脉后口服）、目标谷浓度（5–10 ng/ml）、维持时间（6个月）和减停时间（9个月）。 阅读提示：Methods中“Immunosuppression” |
| 安全性评估 | 不良事件定义与分级标准；MRI扫描时间点（3、12、24、52周）及序列参数；18F-FDG PET时间点（第24周）、剂量（4.0 MBq/kg）、摄取时间（60分钟）及SUVmax测量方法。 阅读提示：Methods中“Outcome measures”、“MRI acquisition and evaluation”、“PET acquisition and evaluation”、“Adverse event assessment” |
| 疗效评估 | ISNCSCI、SCIM III、PainDETECT、NPSI、MAS的评估时间点（第1、3、5、8周及之后每4周至52周）；长期随访评估间隔（每6个月至3年，之后每年）。 阅读提示：Methods中“Outcome measures” |
| 免疫学评估 | MLR试验的细胞来源（患者外周血20 ml，iPSC-NS/PCs为刺激细胞，第三方志愿者外周血10 ml为对照），检测机构（SRL），刺激指数计算。 阅读提示：Methods中“Mixed lymphocyte reaction assay”、Extended Data Table 3 |
| 历史队列比较 | JSSCI-DB队列纳入标准（AIS A级、损伤水平C4–C8、损伤后2周基线、排除严重并发症），样本量52例，分析方式（available-case和LOCF）。 阅读提示：Methods中“Historical cohort analysis”、Supplementary Fig. 1、Supplementary Tables 3–6 |