单核RNA测序揭示Vldlr-/-小鼠视网膜新生血管化过程中内皮细胞和Müller细胞的内质网应激

目的：内质网（ER）应激和未折叠蛋白反应（UPR）信号通路与病理性新生血管化有关，但其在Vldlr–/–小鼠自发性视网膜内/视网膜下新生血管化中的作用尚不清楚。我们对发生新生血管化的成年Vldlr–/–小鼠视网膜及年龄匹配的Vldlr+/+对照视网膜进行了单核RNA测序（snRNA-seq）。我们检查了Vldlr–/–视网膜细胞类型中的差异表达基因，以识别在病理性新生血管化过程中视网膜细胞类型选择性激活的应激信号通路。方法：对P46 Vldlr–/–和Vldlr+/+视网膜进行snRNA-seq，并在视网膜细胞群体中评估与ER应激和UPR信号通路相关的差异表达基因和通路。对视网膜切片进行KDEL和C/EBP同源转录因子蛋白（CHOP）免疫染色，以进一步识别ER应激增加的视网膜细胞类型。通过isolectin B4（IB4）标记新生血管簇和视网膜下新生血管化来评估视网膜新生血管化。通过视网膜电图（ERG）评估视网膜功能，包括振荡电位。结果：IB4染色显示明显的新生血管簇和异常血管延伸进入外视网膜/视网膜下间隙。ERG和振荡电位显示视网膜功能显著降低。snRNA-seq揭示ER应激/UPR信号通路相关基因在内皮细胞和Müller细胞中选择性显著上调。在IB4阳性异常血管和活化的Müller细胞突起中观察到强烈的KDEL和CHOP免疫反应性，支持这些视网膜细胞群体中ER应激增加。结论：在发生病理性新生血管化的Vldlr–/–视网膜中，内皮细胞和Müller细胞显示ER应激和UPR激活增加。