研究人群纳入与样本采集
建立妊娠晚期孕妇研究队列并获取尿液和血液样本用于暴露和效应生物标志物分析。
在Kastamonu Training and Research Hospital于2023年10月至2024年8月纳入健康妊娠晚期孕妇,采集首次晨尿和空腹静脉血,并收集社会人口学、人体测量、妊娠史和膳食数据。
Dietary Bisphenol A Exposure and Urinary Bisphenol A Levels During Late Pregnancy: Associations with Inflammatory and Oxidative Stress Biomarkers
横断面人群研究,含尿BPA、尿氧化损伤标志物、血清炎症及氧化应激指标检测与多变量回归、中介分析
86名妊娠晚期(27–36周)孕妇 孕妇首次晨尿样本 孕妇空腹静脉血样本
尿BPA以肌酐校正后表达为µg/g creatinine,并分析其与尿8-异前列腺素、8-OHdG的Spearman相关性 多变量线性回归模型1校正年龄、孕周、孕前BMI和能量摄入,含尿标志物时额外校正尿肌酐;模型2额外校正DII和DTAC 膳食BPA暴露分别由3天膳食记录和FFQ估算,采用EFSA中值及土耳其罐头食品迁移数据赋值BPA浓度 血清IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α、TAS、TOS、OSI、MDA、SOD、GPx、CAT、CRP均以ELISA或比色法检测,每样本重复测定 HQ按EDI除以EFSA 2015与2023 TDI分别计算,HQ>1视为潜在健康风险
提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
建立妊娠晚期孕妇研究队列并获取尿液和血液样本用于暴露和效应生物标志物分析。
在Kastamonu Training and Research Hospital于2023年10月至2024年8月纳入健康妊娠晚期孕妇,采集首次晨尿和空腹静脉血,并收集社会人口学、人体测量、妊娠史和膳食数据。
评估母体尿液BPA暴露水平并以肌酐校正尿液稀释。
采用改良提取和HPLC方法测定总尿BPA,并用HPLC法测定尿肌酐,将尿BPA浓度标准化为µg/g creatinine。
估算膳食BPA摄入并评估膳食炎症和抗氧化特征。
使用3天回顾性膳食记录和半定量FFQ评估膳食摄入,按八类食物估算BPA暴露,并基于FFQ计算DII和DTAC。
评估母体尿液和血清中的氧化损伤、氧化应激、抗氧化酶和炎症标志物。
检测尿8-isoprostane、尿8-OHdG、血清TAS、TOS、OSI、MDA、SOD、GPx、CAT、CRP、IL-1β、IL-6、IL-10和TNF-α。
评估BPA暴露与氧化应激、炎症生物标志物及胎儿/新生儿结局之间的关联和潜在中介效应。
进行Spearman相关、多变量线性回归、稳健回归和SmartPLS中介分析。
按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 尿BPA检测 | 双酚A分析标准品 | Sigma-Aldrich | -- |
| 来源于Helix pomatia的葡糖苷酸酶/芳基硫酸酯酶 | Roche | -- | |
| Agilent 1200系列高效液相色谱系统 | Agilent Technologies | -- | |
| Spherisorb C18 ODS2色谱柱 | -- | -- | |
| 尿8-isoprostane检测 | 竞争性ELISA试剂盒 | BT LAB, Shanghai Korain Biotech Co., Ltd. | EA0077Hu |
| 尿8-OHdG检测 | 竞争性ELISA试剂盒 | Elabscience Biotechnology Inc. | E-EL-0028 |
| 吸光度检测 | BioTek ELx800酶标仪 | BioTek Instruments, Inc. | -- |
| 洗涤步骤 | BioTek ELx50自动洗板机 | BioTek Instruments, Inc. | -- |
| 血清炎症因子检测 | IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α ELISA试剂盒 | BT LAB | E0143Hu, E0090Hu, E0102Hu, E0082Hu |
| 血清TAS检测 | 比色法试剂盒 | Rel Assay Diagnostics | RL0017 |
| 血清TOS检测 | 比色法试剂盒 | Rel Assay Diagnostics | RL0024 |
| 血清SOD检测 | 比色法试剂盒 | Otto Scientific | Otto3047 |
| 血清CAT检测 | 商业化试剂盒 | Elabscience | E-BC-K031-S |
| 血清GPx检测 | 比色法试剂盒 | Otto Scientific | Otto2085 |
| 血清CRP检测 | 免疫比浊法 | Otto Scientific | OttoBC138 |
| 生化指标检测 | Mindray BS-400全自动生化分析仪 | Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd. | -- |
| 吸光度检测 | 酶标仪 | Rel Assay Diagnostics | RL0505 |
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 研究人群与样本量 | 最终样本86名;孕周27–36周;年龄19–40岁;排除慢性病、急性感染、近3个月COVID-19、多胎妊娠、妊娠并发症、吸烟/饮酒、职业化学暴露等 阅读提示:见Methods 2.1 Study Design、2.2 Participants及Figure 1参与者选择流程图 |
| 尿BPA检测 | 首次晨尿、去塑化玻璃容器、−20°C保存;500 µL尿样、酶水解3 h、n-hexane–diethyl ether提取、HPLC荧光检测;LOD 1.0 ng/mL、LOQ 2.5 ng/mL;尿BPA结果以µg/g creatinine表达 阅读提示:见Methods 2.7.1 Urinary BPA and Creatinine Analyses |
| 膳食BPA暴露估算 | 3天膳食记录和FFQ;EFSA中值及土耳其罐头食品BPA迁移数据;八类食物分组;EDI按Cj × IRj / BW计算;FFQ覆盖前3个月 阅读提示:见Methods 2.3 Data Collection and Dietary Assessment、2.5 Calculation of Dietary BPA Exposure及Table 3 |
| DII和DTAC计算 | DII含43种膳食成分,排除反式脂肪酸和酒精;DTAC基于FRAP数据库并标准化为每1000 kcal;DII中位数−2.33(−3.09至−1.08),DTAC均值5.66 ± 1.62 mmol/1000 kcal 阅读提示:见Methods 2.4 Dietary Inflammatory Index and Dietary Total Antioxidant Capacity及Table 2 |
| 多变量回归和中介分析 | 模型1校正年龄、孕周、孕前BMI、能量摄入,含尿标志物时额外校正尿肌酐;模型2额外校正DII和DTAC;未多重检验校正;p < 0.05为显著 阅读提示:见Methods 2.8 Statistical Analysis、Table 4和Supplementary Tables S7–S8 |