生发泡卵母细胞的挽救:一种无价值的治疗还是一种以患者为中心的方法?八年预后不良患者的临床经验

Germinal vesicle oocytes' rescue: a worthless treatment or a patient-centred approach? Eight years of clinical experience in poor prognosis patients

作者信息Danilo Cimadomo, Laura Escrich, Lucía Alegre, Noelia Grau, Arancha Galán, Cristina Rodríguez Varela, Marilena Taggi, Sara Pasku, Laura Rienzi, Ernesto Bosch, María-José Escribà
PMID42442002
发布时间2026-09-01
DOI10.1093/humrep/deag115

实验完整度

中

回顾性队列研究,包含临床结局分析及时差录像形态动力学亚分析,但缺少前瞻性对照或独立功能验证,样本量小。

主要模型

GV卵母细胞(来源为控制性卵巢刺激后回收的未成熟卵母细胞) 同胞对照MII卵母细胞 临床队列(47名预后不良患者)

重点核对

患者年龄<39岁 MII卵母细胞数≤6且成熟率<80%(基于触发排卵时≥14mm卵泡) GV卵母细胞数≥4 GV培养时间最长24小时 单次整倍体囊胚移植

摘要

研究问题:在成熟卵母细胞产量意外低的患者中,生发泡(GV)卵母细胞通过体外成熟(IVM)挽救是否提供有意义的临床获益,哪些患者特征最可能获益? 总结答案:特别是在获得更多GV卵母细胞的患者中,GV挽救增加了每个周期的成熟卵母细胞、受精卵、囊胚和整倍体胚胎的数量,减少了移植取消,并促使累积活产率相对增加20%。 已知信息:在控制性卵巢刺激期间获取的未成熟卵母细胞传统上因其发育潜能降低而被丢弃。既往研究表明GV挽救可能增加可用卵母细胞,但其临床价值,尤其是在非整倍体植入前遗传学检测(PGT-A)框架内,仍不明确。 研究设计、规模、持续时间:这项回顾性临床研究分析了单中心8年(2017年1月至2024年12月)的GV挽救经验,包括47名接受ICSI联合PGT-A的女性(<39岁),她们显示出次优的成熟卵母细胞回收率(MII卵母细胞≤6,相对于触发排卵时≥14mm卵泡的成熟率<80%,且≥4个GV卵母细胞)。对可用的挽救GV卵母细胞和同周期对照MII卵母细胞的时间延迟录像进行亚分析,以概述挽救和囊胚形成的形态计量学和形态动力学决定因素。 参与者/材料、设置、方法:所有回收的MII卵母细胞均行ICSI,而GV卵母细胞在时差系统中额外培养24小时;那些挽救的(rMII)被授精。结局包括受精率、囊胚形成率、形态质量、整倍体率以及玻璃化加热整倍体囊胚移植后的临床结局。患者获益定义为从rMII获得≥1个整倍体囊胚。记录形态计量学特征(相关面积、直径、周长)和形态动力学参数(GVBD时间、MI期持续时间和第一极体(PB1)排出、第二极体(PB2)排出、原核出现、并列和消失、卵裂)。 主要结果和偶然性的作用:在266个GV卵母细胞中,53.7%成熟为MII,使每位患者的可用MII产量平均增加75%。MII和rMII的受精率相当,而rMII的囊胚形成率显著较低。然而,rMII来源的囊胚表现出与对照相似的形态和整倍体率,并在11名患者中贡献了≥1个额外的整倍体胚胎。这些患者的卵丘-卵母细胞复合体总数、GV数量更高,且rMII受精率和囊胚形成率更优,尽管人口统计学和基础参数以及同胞对照MII能力相当。GV挽救使获得整倍体囊胚的患者数量相对增加8%,使获得活产的患者数量相对增加20%。成功挽救的GV卵母细胞显著更大,且GVBD更快。rMII卵母细胞显著小于同胞对照MII卵母细胞。在前者中,较早的原核并列和较短的卵裂时间与成功的囊胚发育相关。 局限性、注意事项:该设计是在一家私立IVF中心进行的回顾性研究。样本量较小,尽管这是刻意严格纳入标准的结果。研究结果适用于在经验丰富的实验室中接受PGT-A周期、MII产量意外低的患者。 更广泛的意义:GV挽救代表了一种以患者为中心的策略,可在成熟卵母细胞产量有限的周期中提高累积IVF成功率。进一步完善患者选择标准并标准化这种方法可能在未来评估中提高其临床效用。定义人工智能驱动的管道以提取相关的形态计量学/形态动力学特征,为未来的预测工具提供信息,以及改进挽救方案,代表了该研究领域重要的即将到来的创新。 研究资助:本研究部分由ESHRE 2024研究基金支持。 利益冲突:作者声明与本文内容无利益冲突。 试验注册号:不适用。

实验结论

提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。

研究问题
在成熟卵母细胞产量意外低的预后不良患者中,GV卵母细胞挽救是否能提供有意义的临床获益,以及哪些患者特征最可能获益?
核心机制
GV卵母细胞的成功挽救依赖于其内在发育潜能,表现为卵母细胞更大和GVBD更快,而rMII卵母细胞虽小于同胞对照MII,但其形成的囊胚在形态和整倍体率上与对照相当。
主要证据
基于47名患者的266个GV卵母细胞,其中53.7%成熟为rMII,受精率与对照相当,但囊胚形成率较低;rMII来源的囊胚贡献了至少1个额外整倍体胚胎于11名患者,并使累积活产率相对增加20%。
研究意义
GV挽救是一种以患者为中心的策略,可增加累积IVF成功率,尤其适用于具有更多GV卵母细胞的患者;未来需要进一步优化患者选择标准并标准化方案。

研究路径

按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。

1

患者筛选与分组

确定可能从GV挽救中获益的预后不良患者群体

纳入47名接受ICSI联合PGT-A周期的女性,年龄<39岁,MII卵母细胞数≤6,成熟率<80%,且GV卵母细胞数≥4。根据是否从rMII获得≥1个整倍体囊胚,将患者分为获益组(n=13)和非获益组(n=34)。

2

GV卵母细胞的挽救与ICSI

评估GV卵母细胞在体外成熟并受精的能力

GV卵母细胞在时差培养箱中培养最多24小时,达到MII的(rMII)进行ICSI。记录成熟率、受精率。

3

胚胎培养与形态评估

比较rMII来源胚胎与对照MII来源胚胎的发育潜能

将受精卵单独培养至第5或第6天,根据ASEBIR标准评估囊胚形态,并记录发育天数。

4

PGT-A活检与整倍体评估

比较rMII来源胚胎与对照胚胎的染色体整倍体率

对第5/6天囊胚滋养外胚层进行活检,送外部实验室进行PGT-A分析。比较整倍体率。

5

玻璃化冷冻与移植

评估rMII来源囊胚移植后的临床结局

对活检后的囊胚进行玻璃化冷冻。子宫内膜准备后,优先移植对照来源的整倍体囊胚,若无对照胚胎则移植rMII来源的。记录妊娠结局。

6

时差录像形态动力学分析

识别与成功挽救和囊胚形成相关的卵母细胞形态动力学特征

从EmbryoScope中提取GV卵母细胞的录像,测量形态计量参数(如卵母细胞面积、直径、ZP厚度)并注释形态动力学事件(如GVBD时间、PN并列时间、卵裂时间)。通过回归分析确定与成熟和囊胚形成相关的因素。

研究方法

按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。

产品清单

实验环节名称品牌货号
CSCM-NXC培养基FUJIFILM Irvine Scientific--
Gems连续培养基Genea-Biomedx--
达必佳Ipsen--
补佳乐Bayer--
EvopadJanssen Cilag--
安琪坦SEID--
ProgeffikEffik--
EmbryoScopeVitrolife--
GeriGenea-Biomedx--
ImageJ----

关键环节

汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。

环节核对要点
患者纳入
年龄<39岁;MII卵母细胞数≤6;成熟率<80%;GV卵母细胞数≥4
阅读提示:Materials and methods 部分
GV挽救
培养时间最长24小时;温度37°C;5% CO2和5% O2;培养基CSCM-NXC
阅读提示:Materials and methods 部分,GV rescue approach
胚胎培养
培养天数5-6天;培养基Gems
阅读提示:Materials and methods 部分,Embryo culture
结果评估
主要胚胎学结局:每受精卵母细胞的整倍体囊胚率;主要临床结局:每移植的活产率
阅读提示:Materials and methods 部分,Outcome measures