针对实体瘤微环境的双模块纳米抗体CAR-T细胞技术平台

背景：CAR-T疗法在血液癌症中有效，但在实体瘤中面临抗原异质性和免疫抑制性肿瘤微环境（TME）的挑战。全身性CTLA-4阻断可增强免疫，但常导致严重不良事件。为克服这些限制，我们开发了一种基于双模块纳米抗体的CAR-T平台，靶向癌症相关成纤维细胞上的成纤维细胞活化蛋白（FAP），并在肿瘤基质内局部释放抗CTLA-4纳米抗体。方法：生成FAP/CTLA-4双模块CAR-T细胞，并在体外评估其抗原特异性细胞毒性、细胞因子释放和耗竭。在异种移植模型中评估抗肿瘤疗效，测量肿瘤生长、生存和T细胞浸润（伦理批准号：202001011）。一名难治性胶质母细胞瘤患者接受鞘内输注；监测临床反应、脑脊液（CSF）细胞因子（伦理批准号2022-0553-01）和安全性。通过转录组测序和多重免疫荧光染色分析肿瘤和免疫微环境变化。结果：在体外，工程化CAR-T细胞表现出强效细胞毒性、细胞因子产生和减少的耗竭。在体内，它们诱导肿瘤消退、延长生存并增加T细胞浸润。在胶质母细胞瘤患者中，鞘内给药导致疾病稳定、CSF细胞因子升高和良好的安全性。转录组测序和多重免疫荧光染色表明TME重塑为免疫活跃状态。结论：FAP/CTLA-4 DMN CAR-T通过局部免疫调节克服免疫抑制性实体瘤微环境，在临床前模型和一名难治性胶质母细胞瘤患者中显示出有希望的疗效。