离子化脂质来源对负载siRNA的脂质纳米颗粒质量和稳定性的影响

siRNA-脂质纳米颗粒（LNP）疗法的成功开发在很大程度上依赖于辅料质量的稳定性，尤其是离子化脂质MC3，它常用于如Onpattro等临床获批产品中。MC3在RNA封装、内体逃逸和生物相容性中发挥关键作用。随着监管框架支持仿制siRNA-LNP的开发，本研究首次系统比较了MC3纯度中供应商依赖的变化如何影响siRNA-LNP的理化性质和体外性能。多平台分析工作流程的杂质分析显示，在所有测试的三个供应商中，MC3的二烯酮副产物是最丰富的杂质，并且它被保留在LNP制剂中。尽管纯度水平存在差异（86-99%）以及粒径、多分散指数（PDI）和独特热行为方面存在适度差异，但LNP表现出相似的关键质量属性（CQA），包括包封效率、表面电荷、表观pKa和内部结构。体外研究表明，所有LNP在HepG2细胞中以5 nM剂量实现了约60%的转甲状腺素蛋白（TTR）mRNA和蛋白敲低，并在30 nM浓度下维持了HepG2细胞活力，表明具有相当的功效和生物相容性。人外周血单核细胞（PBMC）检测显示，使用任何来源的MC3配制的LNP均未诱导显著的细胞因子产生。在稳定性评估中，尽管在室温下储存超过70天的LNP没有观察到明显的化学变化，但观察到粒径和PDI等理化性质的变化。然而，这些变化并未影响基因沉默效率或生物相容性。总体而言，评估的供应商间MC3纯度的差异影响了siRNA-LNP的某些理化属性，而体外性能基本不受影响。然而，控制脂质杂质谱对于确保一致的理化特性和支持质量保证很重要。总的来说，这些发现为siRNA-LNP向仿制开发推进过程中的生产和监管考虑提供了宝贵的见解。