HBeAg阳性和HBeAg阴性慢性乙型肝炎肝内整合HBV DNA模式的差异

背景：乙型肝炎表面抗原（HBsAg）可来源于肝内共价闭合环状DNA（cccDNA）和整合的乙型肝炎病毒（HBV）DNA（iDNA）。目的：我们评估了北美乙型肝炎研究网络中24例HBeAg阳性和32例HBeAg阴性的未接受治疗的慢性乙型肝炎（CHB）参与者肝组织中的cccDNA和iDNA。设计：对于cccDNA分析，DNA经热变性并用质粒安全ATP依赖性DNase消化以去除松弛环状DNA和iDNA，然后进行实时聚合酶链反应。对于iDNA检测，总DNA进行HBV杂交靶向下一代测序分析以鉴定HBV-宿主连接序列。评估了HBV cccDNA和iDNA与其他病毒学标志物的比较。结果：HBeAg阳性CHB患者肝内cccDNA、血清HBV DNA、HBV RNA、乙肝核心相关抗原和定量乙型肝炎表面抗原较高。肝内乙型肝炎核心抗原染色在HBeAg阳性样本中为87%，在HBeAg阴性样本中仅为13%（p<0.0001）。HBsAg染色在两组中均超过85%。23例（95.8%）HBeAg阳性参与者iDNA占肝内总HBV DNA的比例≤50%，而25例（78.1%）HBeAg阴性参与者iDNA比例>50%。对于HBeAg阳性CHB，iDNA整合位点随机，仅15.9%定位于直接重复2（DR2）-DR1区域。对于HBeAg阴性CHB，52.4%的iDNA整合聚集在DR2-DR1。微同源介导的末端连接模式的双链线性DNA HBV整合在HBeAg阳性肝脏中更常见。结论：HBeAg阴性CHB与高HBsAg染色浓度相关，尽管cccDNA水平低，提示iDNA是HBsAg的主要来源。HBeAg阴性CHB中DR2-DR1 iDNA分布的高频率提示该整合子在CHB自然史中的选择优势和克隆扩增。