ARHGAP9通过Rac1/β-Catenin/LEF1信号轴对高危晚期视网膜母细胞瘤化疗耐药的影响

目的：摘除术后辅助化疗耐药持续驱动高危晚期视网膜母细胞瘤（RB）的复发和转移，构成重大临床挑战。为鉴定候选基因，先前的转录组分析显示，在依托泊苷耐药Y79/EDR细胞系中，Rho GTP酶激活蛋白9（ARHGAP9）表达显著降低。本研究旨在进一步探讨ARHGAP9在高危晚期RB化疗耐药中的作用。方法：分析8例高危晚期RB患者外周血样本的全外显子测序和简化代表性亚硫酸氢盐测序图谱，以鉴定与RB预后相关的胚系遗传或表观遗传改变的基因。在稳定的ARHGAP9沉默和过表达细胞系中进行体外和体内药物反应性及分子机制研究。结果：通过基于外周血的基因组和表观基因组分析鉴定出ARHGAP9，并通过功能研究进一步验证。功能实验表明，ARHGAP9敲低显著降低了细胞对卡铂和依托泊苷的敏感性，而其过表达在体内外恢复了药物反应性。机制分析表明，ARHGAP9下调显著增强了作为其催化底物的Ras相关C3肉毒杆菌毒素底物1（Rac1）的活性，促进了Rac1-β-catenin相互作用，并促进了它们的核积累。该过程诱导淋巴样增强子结合因子1（LEF1）-β-catenin复合物的形成，并增加了下游蛋白如c-Myc、cyclin D1和Bcl-2的表达，这些蛋白导致RB化疗耐药。结论：这些发现提供了ARHGAP9通过Rac1/β-catenin/LEF1信号轴调节RB药物反应的机制见解，并提示ARHGAP9作为晚期高危RB的候选预后指标或治疗靶点值得进一步研究。