一种基于两阶段激光诱导视网膜下纤维化小鼠模型的AMD新型眼部纤维化特征

目的：视网膜下纤维化是新生血管性年龄相关性黄斑变性（AMD）中不可逆视力丧失的主要原因，但由于分子驱动因素不明确，目前尚无有效的抗纤维化疗法。本研究旨在利用两阶段激光诱导的视网膜下纤维化小鼠模型，推导并验证一种持续性的眼部纤维化特征，并评估其在人类AMD中的转化相关性。方法：在第二次激光损伤后的第3、6和10天，对两阶段模型中的视网膜色素上皮（RPE）/脉络膜组织进行RNA测序（RNA-seq）。在所有时间点观察到由88个持续上调基因组成的新型核心纤维化特征，并在独立的鼠标数据集（GSE189555）和多个高加索人AMD RNA-seq数据集（GSE115828、GSE146887、GSE135092）中进行交叉验证，包括手术提取的脉络膜新生血管（CNV）膜和黄斑RPE/脉络膜样本。通过免疫荧光在人类视网膜下纤维化和年龄匹配组织中进一步验证关键特征基因。结果：新的眼部纤维化特征在上皮-间质转化、补体激活和炎症通路中富集，并显示出脉络膜特异性表达，视网膜受累最小。在独立的慢性小鼠数据和多个高加索人AMD数据集（外周视网膜、手术提取的CNV膜和黄斑RPE/脉络膜）中的交叉验证证实了在晚期疾病阶段的进行性富集。人类纤维化组织中的免疫荧光验证了关键基因（tenascin C、金属蛋白酶组织抑制剂1和apelin受体），并显示与肌成纤维细胞样细胞和小胶质细胞的共定位。结论：我们确定了一种新的、持续性的、脉络膜特异性的眼部纤维化特征，具有强烈的跨物种保守性，突出了纤维化相关的驱动因素，并为理解新生血管性AMD中的视网膜下纤维化发展和靶向抗纤维化治疗提供了有价值的转化工具。