膜性肾病中NELL1自身抗体的定量血清学检测

引言：膜性肾病（MN）包含由靶向足细胞相关蛋白的自身抗体驱动的不同亚型，其中之一是神经EGFL样1（NELL1）。目前，NELL1相关MN的诊断主要依赖于肾活检的质谱分析或免疫染色。抗NELL1抗体的血清学检测尚未商业化，但包括Western印迹、间接免疫荧光和ELISA在内的研究性检测方法最近已被开发。然而，这些方法目前仅在研究环境中进行，且ELISA可能不足以特异性用于初步诊断目的。需要高通量免疫测定法来诊断和监测NELL1自身抗体阳性的MN患者。方法：在这里，我们开发了一种荧光素酶免疫沉淀系统（LIPS）来检测循环中的NELL1自身抗体。在确定NELL1的最佳抗原区域后，我们使用来自经活检证实的NELL1+验证队列的血清样本评估了该检测的诊断性能。然后，我们在一个独立的NIH临床评估队列中评估了NELL1血清阳性率，并检查了选定阳性病例纵向样本中的抗体动态。结果：使用已知NELL1阳性血清的初步测定开发表明，与全长NELL1（810个氨基酸）相比，与高斯荧光素酶融合的NELL1蛋白N端片段（氨基酸1-550）产生了优越的诊断性能。在一个由20名经活检证实的NELL1阳性和20名PLA2R+/NELL1阴性患者的血清组成的验证队列中，该LIPS检测显示出90%的敏感性和100%的特异性，并与ELISA一致，但具有更好的特异性。对NIH队列中63例MN病例和20例疾病对照的进一步测试确定了6例NELL1阳性MN病例。对三例NELL1血清阳性病例的纵向分析显示，自身抗体水平与蛋白尿相关，表明监测抗体滴度可能有助于临床管理，如同PLA2R抗体那样。结论：我们的NELL1 LIPS检测为诊断NELL1相关MN、表征临床亚群和监测治疗反应提供了一种非侵入性工具。