研究队列构建和分组
纳入符合条件的PGT-A周期，并分为Midway PGT-A组和传统PGT-A组，以比较临床结局。
从郑州大学第一附属医院生殖中心数据库回顾性纳入2020年1月至2023年1月间的463个PGT-A周期，其中Midway PGT-A组202个周期，传统PGT-A组261个周期。基于纳入和排除标准筛选患者。
关于丁香通
公司信息
个人用户
企业机构
无忧采购 轻松科研
- 移动端
Midway PGT-A的临床有效性：与传统PGT-A的比较研究及受精策略分析
Clinical validity of Midway PGT-A: a comparative study with traditional PGT-A and analysis of fertilization strategies
实验完整度
中回顾性队列研究，包含463个PGT-A周期，比较两组染色体异常谱和临床结局，并进行了IVF/ICSI亚组分析和多变量回归分析，但缺乏干预性实验或机制验证。
主要模型
囊胚（来自Midway PGT-A和传统PGT-A周期） IVF/ICSI受精的胚胎 患者队列（463个PGT-A周期）
重点核对
受精方式（IVF vs ICSI） 女性年龄（作为负预测因子） 活检囊胚数 染色体异常亚型分类 临床妊娠率、着床率、流产率、活产率等结局指标
摘要
本研究旨在评估Midway PGT-A的临床效用，以及受精方式（IVF vs ICSI）是否影响其染色体检测结果和临床结局。一项2020-2023年的回顾性队列研究分析了463个PGT-A周期，包括202个Midway PGT-A周期（132个IVF和70个ICSI亚周期）和261个传统PGT-A周期，比较了囊胚非整倍体谱和临床妊娠结局。结果显示，与传统PGT-A相比，Midway PGT-A的活检囊胚数较少（P < 0.05），数值染色体异常率较高（P < 0.05），结构染色体异常率较低（P < 0.05）。在Midway PGT-A组中，IVF和ICSI亚周期的整倍体和非整倍体率相似，但IVF亚周期的临床妊娠率（P < 0.05）和着床率（P < 0.05）显著更高。多变量逻辑回归证实，与IVF相比，ICSI独立地与较低的临床妊娠率相关。总之，Midway PGT-A与传统PGT-A相比提供了等效的结果。IVF不改变Midway PGT-A的染色体检测结果，并可能进一步优化临床生殖性能，验证了Midway PGT-A对移植后获得PGT-A适应症患者的临床价值。
实验结论
提炼研究问题、关键发现与证据，快速把握文章的核心贡献。
- 研究问题
- Midway PGT-A是否具有与传统PGT-A相当的临床价值？不同受精方式（IVF vs ICSI）是否影响其染色体检测结果和临床结局？
- 核心机制
- Midway PGT-A经历了两次玻璃化/解冻，但额外的冷冻保存不影响胚胎染色体稳定性；IVF可能通过保留透明带和放射冠的自然精子选择机制，提高胚胎发育潜能和着床率。
- 主要证据
- 基于463个周期的回顾性队列，比较了Midway PGT-A和传统PGT-A的整倍体率、非整倍体亚型分布和临床结局，并通过多变量逻辑回归调整混杂因素，发现IVF与较高的临床妊娠率相关。
- 研究意义
- Midway PGT-A为移植失败后获得PGT-A适应症的患者提供了一种个性化且经济有效的策略，避免重新开始IVF/ICSI周期，提高现有胚胎利用率，并挑战了PGT-A周期中常规使用ICSI的临床惯例。
研究路径
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
IVF和胚胎培养
获得可活检的囊胚，并比较不同受精方式对胚胎发育的影响。
Midway PGT-A组根据男性精液参数采用IVF或ICSI受精，胚胎培养至第3天或第5/6天，评估形态学质量，剩余胚胎玻璃化冷冻。传统PGT-A组均采用ICSI受精，培养至第5/6天行囊胚活检后玻璃化冷冻。
滋养层活检
获取滋养层细胞用于染色体分析，并比较不同来源囊胚的活检。
Midway PGT-A组活检囊胚来源于第3天冷冻胚胎解冻后培养至第5/6天，或第5/6天直接冷冻的囊胚。依据囊胚阶段标准操作：5-6期囊胚抽吸远离内细胞团的3-5个滋养层细胞；3-4期囊胚使用OCTAX激光打孔后抽吸。传统PGT-A组在受精后第4天激光打孔，第5/6天抽吸3-5个滋养层细胞。活检后囊胚和细胞分别处理。
活检后囊胚玻璃化冷冻
保存活检后的囊胚，以便后续解冻移植。
使用Kitazato®和VitaVitro®玻璃化冷冻试剂盒，平衡液和玻璃化溶液室温平衡30分钟，囊胚依次在平衡液中孵育8-10分钟，玻璃化溶液中45-60秒，然后装载至cryotop上直接投入液氮快速冷却，储存于液氮罐。
NGS检测和数据分析
对滋养层细胞进行染色体分析，分类胚胎染色体状态。
滋养层细胞样本使用HumanCytoSNP-12 DNA Array (Illumina, USA)按照制造商方案（Yikon Genomics, China）进行分析，数据使用Illumina Genome Studio和KaryoStudio软件处理。胚胎分为整倍体、数值异常、结构异常和复杂异常四类，仅移植整倍体胚胎。
囊胚解冻和移植
将整倍体囊胚解冻并移植，评估临床结局。
选择整倍体囊胚，使用Kitazato®和VitaVitro®解冻试剂盒解冻，解冻液在37°C预平衡≥2小时，稀释液、洗涤液1和2室温准备。囊胚依次在TS中1分钟、DS中3分钟、WS1中5分钟、WS2中3分钟孵育，然后培养在囊胚培养液中，37°C、6% CO2，然后进行单囊胚移植。
子宫内膜准备和FET
选择合适的子宫内膜准备方案，为胚胎移植做准备。
根据患者月经规律性和排卵功能选择自然周期或激素替代治疗（HRT）周期。自然周期监测卵泡发育和排卵；HRT周期口服雌二醇促进内膜生长，内膜厚度≥8mm时补充孕酮。
结局评估和统计分析
比较两组及亚组的临床结局，并识别独立预测因素。
主要结局为胚胎整倍体/非整倍体率，次要结局包括临床妊娠率、着床率、流产率和活产率。使用SPSS 21.0进行统计分析，包括t检验、Mann-Whitney U检验、卡方检验和多变量二元逻辑回归。
研究方法
按研究目的归类文中使用的方法，便于定位所需技术。
产品清单
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 胞浆内单精子注射 | 透明质酸酶 | Sage, USA | -- |
| 胚胎培养 | 序贯培养液 | Vitrolife, Sweden; Cook, Australia; Sage, USA | -- |
| 滋养层活检 | OCTAX激光系统 | -- | -- |
| 四孔板 | Oosafe, Denmark | -- | |
| 胚胎玻璃化冷冻 | Kitazato®玻璃化冷冻试剂盒 | Kitazato, Japan | -- |
| VitaVitro®玻璃化冷冻试剂盒 | VitaVitro, China | -- | |
| 胚胎解冻 | Kitazato®玻璃化解冻试剂盒 | Kitazato, Japan | -- |
| VitaVitro®玻璃化解冻试剂盒 | VitaVitro, China | -- | |
| 胚胎遗传学检测 | HumanCytoSNP-12 DNA芯片 | Illumina, USA | -- |
| XK028 | Yikon Genomics, China | -- |
关键环节
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| ivf/icsi受精 | 受精方式（IVF vs ICSI），基于男性精液参数；IVF步骤包括共孵育和去颗粒细胞时间；ICSI步骤包括透明质酸酶处理 阅读提示：Materials and methods, In vitro fertilization and embryo culture |
| 胚胎培养 | 培养液品牌、气态环境（6% CO2）、培养至第3天或第5/6天 阅读提示：Materials and methods, In vitro fertilization and embryo culture |
| 滋养层活检 | 活检囊胚阶段、活检细胞数量（3-5个）、激光打孔条件、活检后处理 阅读提示：Materials and methods, Trophectoderm biopsy |
| 玻璃化冷冻和解冻 | 冷冻和解冻试剂盒、孵育时间（ES 8-10min, VS 45-60s; TS 1min, DS 3min, WS1 5min, WS2 3min） 阅读提示：Materials and methods, Blastocyst vitrification after biopsy and Blastocyst warming and transfer |
| 胚胎遗传学检测 | NGS平台（HumanCytoSNP-12）、数据分析软件、分类标准 阅读提示：Materials and methods, NGS testing and data analysis |
| 胚胎移植 | 单囊胚移植、子宫内膜准备方案（自然周期或HRT）、内膜厚度阈值（≥8mm） 阅读提示：Materials and methods, Endometrial preparation for FET |
| 临床结局评估 | 临床妊娠率、着床率、流产率、活产率定义 阅读提示：Materials and methods, Outcome measures and clinical outcomes |
| 统计分析 | 统计检验方法、多变量回归模型包含的协变量、P值阈值 阅读提示：Materials and methods, Statistical analysis |