臭氧通过抑制中性粒细胞胞外陷阱缓解肝细胞癌恶性腹水的机制

肝细胞癌的恶性腹水通常是疾病晚期和预后不良的标志，也被认为与中性粒细胞胞外陷阱（NET）网络介导的慢性炎症有关。尽管臭氧作为一种强氧化剂，具有显著的抗菌和抗炎作用，但其治疗恶性肝腹水的效果尚不清楚。我们首先测量了肝癌患者和健康个体外周血中NETs的水平。接下来，我们构建了H22荷瘤小鼠模型，观察各组的腹围、体重、存活率和存活时间；通过免疫荧光标记小鼠肠道组织中与NETs相关的蛋白；通过酶联免疫吸附试验测量腹水中cf-DNA和细胞因子如：肿瘤坏死因子α（TNF-α）、血管内皮生长因子（VEGF）、白细胞介素6（IL-6）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）和干扰素γ（IFN-γ）的水平。通过免疫细胞化学检测各组小鼠肠道组织中磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（P-AMPK）和清道夫受体A（SR-A）的表达水平。我们进一步通过Western blotting检测腹水沉积物中P-AMPK和SR-A蛋白的表达。结果显示，肝细胞癌患者血浆中NETs水平高于正常受试者（P < 0.01）。与模型组相比，臭氧治疗组的腹围和体重显著降低，而存活率和存活时间呈剂量依赖性增加（均P < 0.05）。模型小鼠肠道组织中性粒细胞聚集体中NET相关的瓜氨酸化组蛋白H3和髓过氧化物酶丰富表达，而臭氧治疗组其表达显著降低。与模型组相比，臭氧治疗组H22荷瘤小鼠腹水中cf-DNA、IL-6、IFN-γ、MMP-9、VEGF和TNF-α水平呈剂量依赖性降低（均P < 0.01），而P-AMPK和SR-A蛋白表达较模型组增加。臭氧在H22荷瘤小鼠中显示出显著的抗腹水产生特性，臭氧通过激活AMPK和上调SR-A吞噬损伤相关分子模式减少NETs的产生，从而减少腹水产生。这表明臭氧可作为治疗肝细胞癌恶性腹水的新药物。