建立慢性溃疡性结肠炎大鼠模型
模拟人类溃疡性结肠炎的慢性病理过程
SD大鼠背部剃毛后涂抹2.0% DNCB丙酮溶液致敏,第15天灌胃0.1% DNCB乙醇,第16天灌胃6%乙酸溶液,建立慢性UC模型。
Study on the effect of the treatment of Periplaneta americana L. extract Ento-B by Dinitrochlorobenzene combined with acetic acid induced UC in rats.
包含动物模型建立、药物分组干预、多项指标检测(DAI、CMDI、HS、血清因子、MPO)及病理学评估,但缺乏体外实验或机制层面的深入验证。
SD大鼠慢性溃疡性结肠炎模型
模型建立:2.0% DNCB丙酮溶液背部涂抹0.3 mL/次,每日1次,连续14天;第15天0.1% DNCB乙醇(50%浓度)灌胃0.25 mL/只;第16天6%乙酸溶液0.7 mL灌胃,10秒后用3 mL生理盐水冲洗 分组与给药:模型建立后第7天,按DAI评分分层随机分为模型组、柳氮磺吡啶组(400 mg/kg)和高、中、低剂量Ento-B组(200、100、50 mg/kg),每组10只,连续灌胃14天 检测指标:DAI评分、CMDI评分、HS评分、血清IL-4、IL-10、TNF-α、MDA、SOD、iNOS水平,结肠组织MPO表达 统计方法:数据以x±s表示,正态分布数据用方差检验,非正态分布用秩和检验,p<0.05或p<0.01为差异有统计学意义
提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
模拟人类溃疡性结肠炎的慢性病理过程
SD大鼠背部剃毛后涂抹2.0% DNCB丙酮溶液致敏,第15天灌胃0.1% DNCB乙醇,第16天灌胃6%乙酸溶液,建立慢性UC模型。
比较不同剂量Ento-B与阳性药物柳氮磺吡啶的治疗效果
模型建立后第7天,按DAI评分分组,模型组和正常组给予生理盐水,其他组分别灌胃柳氮磺吡啶或不同剂量Ento-B,连续给药14天。
评价药物对UC大鼠整体疾病严重程度和免疫功能的影响
记录DAI评分,称量肝脏、脾脏、胸腺重量并计算器官指数。
评价药物对结肠黏膜损伤和组织病理学的影响
测量结肠长度和重量,计算结肠指数,按标准进行CMDI和HS评分,制作病理切片进行HE染色观察。
探究药物对免疫和氧化应激相关分子表达的影响
采用ELISA和生化试剂盒检测血清中IL-4、IL-10、TNF-α、MDA、SOD和iNOS的水平。
评估结肠组织中中性粒细胞浸润程度
检测结肠组织中髓过氧化物酶(MPO)的表达。
按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 模型建立 | 乙酸 | Ruijin Ruijinte Chemical Co., Ltd. | 20130604 |
| 药物处理 | 柳氮磺吡啶 | Shenzhen Regent Biochemical Technology Co., Ltd. | 20140925 |
| Ento-B(美洲大蠊提取物) | -- | 20140438 | |
| 血清检测 | 大鼠白细胞介素-4 ELISA试剂盒 | Neobioscience Co., Ltd. | R150929-002a |
| 大鼠白细胞介素-10 ELISA试剂盒 | Neobioscience Co., Ltd. | R150929-002a | |
| 肿瘤坏死因子-α ELISA试剂盒 | Neobioscience Co., Ltd. | 20151125 | |
| 粪便检测 | 隐血试剂盒 | Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute | 20150424 |
| 血清检测 | 丙二醛试剂盒 | Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute | 20151125 |
| 超氧化物歧化酶试剂盒 | Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute | 20151226 | |
| 诱导型一氧化氮合酶试剂盒 | Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute | 20151221 | |
| 称量 | 电子天平 | METTLER TOLEDO | ML204/02 |
| 分光光度检测 | 紫外可见分光光度计 | PERSEE ANALYTICS | T6 New Century |
| 酶标检测 | 酶标仪 | Austria Anthos Company | 201 |
| 干燥 | 电热鼓风干燥箱 | Beijing ever bright medical treatment instrument Co., Ltd. | 101E |
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 动物饲养 | 动物品系、性别、体重、数量、饲养环境(IVC系统,18°C,50% RH) 阅读提示:Methods部分 |
| 模型建立 | DNCB浓度、涂抹剂量、次数、天数;乙酸浓度、剂量、灌胃时间;正常组处理 阅读提示:Methods-Experimental methods- Establishment of the model |
| 分组与给药 | 分组方法、各组剂量、给药方式(灌胃)、给药体积、持续时间 阅读提示:Methods-Experimental methods- Grouping and mode of administration |
| 样本采集与处理 | 麻醉方式、取血方式、血清制备条件、器官称重、结肠处理 阅读提示:Methods-Experimental methods- Grouping and mode of administration |
| 指标检测 | DAI评分标准、CMDI评分标准、HS评分标准、ELISA和生化检测步骤 阅读提示:Methods-Experimental methods- Table 1, 以及各检测试剂盒说明书 |