结核分枝杆菌新诊断生物标志物的鉴定及其在人类结核病血清学诊断中的潜在应用

结核分枝杆菌（M. tuberculosis）差异区域（RD）编码的蛋白质可能作为结核病（TB）诊断试剂。本研究成功克隆了来自 M. tuberculosis RD1‐RD16 的 75 个基因，其中 68 个蛋白质被表达和纯化。使用来自肺结核（PTB）、肺外结核（EPTB）和健康对照（HC）的三份血清池初步筛选单个 RD 蛋白。PTB 或 EPTB 与 HC 组的 OD630 比值≥2 倍为阳性。结果获得 29 个蛋白质。进一步使用 58 份 PTB 样本（38 份涂片阳性 PTB（PTB‐SP）血清和 20 份涂片阴性 PTB（PTB‐SN）血清）、16 份 EPTB 样本、42 份潜伏性结核感染样本和 40 份 HC，通过间接 ELISA 验证了已鉴定抗原的血清学反应。在 PTB 诊断方面，受试者工作特征分析显示 Rv0222 [曲线下面积（AUC），0.8129；95% 置信区间（CI），0.7280–0.8979] 和 Rv3403c（AUC，0.8537；95% CI，0.7779–0.9294）优于 ESAT6/CFP10（AUC，0.7435；95% CI，0.6465–0.8406）。Rv0222 和 Rv3403c 在 PTB‐SP 组中表现出最高的诊断能力（敏感性，86.8%；特异性，80%），而 Rv3403c 在 PTB‐SN 组中表现出最高的诊断能力（敏感性，70%；特异性，80%）。在 EPTB 诊断方面，Rv0222 表现出最高的诊断价值（AUC，0.7523；敏感性，68.8%；特异性，87.5%）。此外，Rv0222 和 Rv3403c 的组合提高了 PTB‐SN 的检测。这些结果表明，Rv0222 和 Rv3403c 可能是活动性结核病血清学诊断的潜在生物标志物。小鼠实验表明，Rv0222 和 Rv3403c 诱导了特异性细胞和体液反应，其特征是产生 IFN‐γ、IgG1 和 IgG2a，但 IgG1 水平高于 IgG2a。